02破碎细胞提取纯化I.材料准备II.破碎细胞或包膜-内容物释放III.核酸分离、纯化IV.沉淀或吸附核酸,并去除杂质V.核酸溶解在适量缓冲液或水中 制备过程: 乙醚洗涤沉淀、去除杂质、提纯RNARNA提取方法(浓盐法)离心去除菌体,收集上清液,调至RNA的等电点(pH2~2.5)浓盐加热使酵母细胞壁破裂,蛋白质变性沉淀使RNA沉淀...
目前在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法提取RNA。稀碱法是利用稀碱裂解细胞壁,使RNA释放出来,这种方法提取时间短,但RNA在此条件下不稳定,容易分解;浓盐法是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的透性,使RNA释放出来,此法易掌握,产品质量较好。酵母含RNA2.67%~10.0%,而DNA的含量仅为0.03%~0.516%,并且...
➢RNA:存在于细胞质中 样本的选择:酵母RNA(RNA占干重的3%10%)制备方法:稀碱法、浓盐法 制备过程:破碎细胞提取纯化 I.材料准备II.破碎细胞或包膜-内容物释放 III.核酸分离、纯化IV.沉淀或吸附核酸,并去除杂质V.核酸溶解在适量缓冲液或水中 RNA提取方法(浓盐法)浓盐加热使酵母细胞壁破裂,蛋白质变性沉淀...
1.浓盐法提取酵母 RNA (1)RNA 的提取:取干酵母一包(约 1~2g)放入 100mL 锥形瓶内,加入 10%NaCl 溶液 30mL,搅匀后将锥形瓶固定在水浴锅内,于沸水浴中加热 40 分 钟。 (2)RNA 的离心分离:将上述锥形瓶从沸水浴中取出,立即用自来水冷却 至室温。然后将锥形瓶内溶液倒入离心管,平衡后 3000 转/分离心...
生物化学与分子生物学实验 实验八 酵母 RNA 的提取及 成分鉴定(浓盐法) 阅读了该文档的用户还阅读了这些文档 6 p. 精炼剂成分.pdf 3 p. 粪便钙卫蛋白检测在腹泻鉴别诊断中的意义.pdf 10 p. 粒子加速器的发展史与应用.pdf 3 p. 米粉的品质评价方法及其原料标准的研究进展_王永辉.pdf 6 p. 管道...
2、与分子生物学实验生物化学与分子生物学实验u 样本的选择:样本的选择:u 酵母酵母RNARNA(RNARNA占干重的占干重的3%-10%3%-10%)u 制备方法:制备方法:u 稀碱法、浓盐法稀碱法、浓盐法生物化学与分子生物学实验生物化学与分子生物学实验破碎细胞破碎细胞提取提取纯化纯化I.I.材料准备材料准备II.II.破碎细胞或...
浓盐法酵母RNA提取中沉淀剂的原理 原因:浓盐法改变细胞膜的通透性。浓盐法提取RNA是用10%NaCl溶液改变细胞膜的通透性,使核酸从细胞内释放出来。实验中主要是将pH调到2.0~2.5,在等电点附近要求要在7.0。DNA携带有合成RNA和蛋白质所必需的遗传信息,生物体发育和正常运作
实验八 酵母RNA的提取及 成分鉴定(浓盐法) 实验目的 掌握浓盐法提纯RNA的基本原理和方法 了解RNA成分鉴定的原理及其方法 实验原理 核酸的分类与分布 样本的选择: RNA提取方法(浓盐法) RNA成分鉴定 RNA在强酸性条件下沸水浴加热可以水解: 1. 磷酸鉴定 2. 碱基(嘌呤)鉴定 3. 核糖鉴定 仪器试剂 仪器 实验操作 ...
实验八 酵母RNA的提取及 成分鉴定(浓盐法) 实验目的 掌握浓盐法提纯RNA的基本原理和方法 了解RNA成分鉴定的原理及其方法 实验原理 核酸的分类与分布 样本的选择: RNA提取方法(浓盐法) RNA成分鉴定 RNA在强酸性条件下沸水浴加热可以水解: 1. 磷酸鉴定 2. 碱基(嘌呤)鉴定 3. 核糖鉴定 仪器试剂 仪器 实验操作 ...