(1)酵母单杂交筛库建立丛枝菌根共生基因调控网络图谱 为了系统性的挖掘调控菌根形成的转录因子,作者使用了酵母单杂交筛库(Y1H)的方法,筛选了能够与51个菌根发育相关的基因的启动子结合的转录因子。作者发现了一个关联密切的由266个转录因子和47个启动子构成的调控网络(图1A)。这些转录因子参与菌根形成,营养代谢和植物...
在酵母单杂交筛库中,我们需要制备多个酵母菌株,每个酵母株中需要含有一个读出界面的诱饵(bait)基因,和许多由人源基因库、功能基因库中随机选择的靶(prey)基因所构成的一个人源/功能基因库。 通过互相杂交可以寻找那些与感兴趣的蛋白质有互动关系的蛋白质。为了能快速检测出抑制诱饵蛋白酵母株,我们可以利用色等其他酶...
南京瑞源生物 酵母单杂交建库及筛库服务 相关文章 企业信息 公司名称: 南京瑞源生物技术有限公司 成立时间: 2019-10-31 企业网站: www.bestofbest.top 登记机关: 南京市栖霞区行政审批局 注册地址: 南京市栖霞区仙林街道纬地路9号江苏仙林生命科技创新园F7栋304到这去 服务咨询 留下您的联系方式,顾问将为您...
酵母单杂交技术服务-酵母单杂交建库筛库-南京正和生物,正和生物的酵母单杂交服务不同于其他公司,是使用优化后的clonetech的pGADT7或者pGADT7-Rec2两套载体构建酵母文库,并且能够提供辅助启动子的设计及诱饵载体的构建。,南京正和生物技术有限公司
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可能你挑选的阳性克隆是杂菌或假阳性。建议你再重复试验一次，并做好阳性对照和阴性对照
酵母单杂交筛库实验流程 酵母单杂交筛库实验流程:①构建BD-转录因子融合质粒;②制备cDNA文库AD融合载体;③转化酵母细胞,构建库;④双杂交筛选,BD与AD阳性克隆交互作用;⑤平板筛选,选择生长在缺陷培养基上的菌落;⑥β-半乳糖苷酶活性检测,验证相互作用;⑦回收阳性克隆,测序鉴定靶基因;⑧生物信息学分析,预测功能与作用...
酵母单杂交筛库实验流程如下: 1.载体构建: 设计并合成含有目的基因启动子序列的DNA片段。 将该片段克隆到酵母表达载体中,构建成诱饵载体。 同时,构建含有转录激活结构域的载体作为猎物载体。 2.酵母菌株培养: 选择合适的酵母菌株,如Y187或AH109。 在适当的培养基中培养酵母菌株,使其处于对数生长期。 3.转化酵母: ...