酵母单杂交筛库实验流程 酵母单杂交筛库实验流程:①构建BD-转录因子融合质粒;②制备cDNA文库AD融合载体;③转化酵母细胞,构建库;④双杂交筛选,BD与AD阳性克隆交互作用;⑤平板筛选,选择生长在缺陷培养基上的菌落;⑥β-半乳糖苷酶活性检测,验证相互作用;⑦回收阳性克隆,测序鉴定靶基因;⑧生物信息学分析,预测功能与作用...
酵母单杂交筛库实验流程如下: 1.载体构建: 设计并合成含有目的基因启动子序列的DNA片段。 将该片段克隆到酵母表达载体中,构建成诱饵载体。 同时,构建含有转录激活结构域的载体作为猎物载体。 2.酵母菌株培养: 选择合适的酵母菌株,如Y187或AH109。 在适当的培养基中培养酵母菌株,使其处于对数生长期。 3.转化酵母: ...
为了寻找优良的酵母菌株,酵母筛库就应运而生。那么酵母筛库的操作流程具 体是怎么样的呢?下面我们就来详细了解一下: 1. 筛选酵母菌株 酵母筛选源于自然环境,因此有许多不同类型的酵母菌株。在进行筛选之前,我们需 要先收集不同来源的酵母样品。这些样品包括来自水、土壤和植物等的酵母菌。通过对这 些酵母菌样品...