结论RT-PCR法检测选择性剪接产物操作方便,对Western蛋白印迹结采评价具有指导意义,但是产生的非特异条带可能是由于某种特殊原因造成,如选择性剪接部位的特异核酸序列,需DNA).9)IJ序做进一步确定。关键词选择性剪接;RT-PCR中图分类号。354文献标志码A文章编号025864646(2012)06-0490-04网络出版地址http://ki.net/...
目前多通过RT-PCR法、S1核酸酶阻断实验、Northern杂交、表达标签序列测序、生物信息学和生物芯片法对选择性剪接进行检测[2]。本研究小组利用RT-PCR方法探究糖原合成酶激酶(glycogen synthase kinase,GSK)3β 和 B 细胞转位基因(B-cell translocation gene,BTG)3基因变异体的作用,并结合电泳图和测序结果进行深入分析。
经过电泳和克隆DNA测序发现GSK-3β中上面2条带为同一产物.对BTG3上(位于319 bp)、下(位于70 bp)2条带进一步PCR扩增后测序,结果发现3个条带均为同一产物.结论 RT-PCR法检测选择性剪接产物操作方便,对Western蛋白印迹结果评价具有指导意义,但是
目的 利用RT-PCR方法检测并分析mRNA选择性剪接变异体.方法 针对糖原合成酶激酶(GSK)3β和B细胞转位基因( BTG)3基因变异体差别设计引物,利用RT-PCR扩增后进行电泳和克隆DNA测序.结果 GSK3β和BTG3的RT-PCR产物电泳均出现3条带,经过电泳和克隆DNA测序发现GSK-3β中上面2条带为同一产物.对BTG3上(位于319 bp),...