Rt-qPCR（实时荧光定量PCR）是分子生物学的基础实验，主要包括三大步骤：RNA提取、逆转录成cDNA、实时荧光定量PCR。虽然看起来逆转录实验只是将几种试剂加在离心管中混匀，进行反应即可，但在实际操作过程中，还有许多细节需要注意。根据其化学原理不同，Rt-qPCR可以分为2种检测方法：一种为探针法，如TaqMan探针法；...
将Rt-qPCR所需要的试剂如:无酶水,SYBR,上下游引物等以及样品(cDNA)置于冰上备用。 03混合无酶水、SYBR、上下游引物 根据以上点样规划,计算每种引物所在位置孔位数,如内参基因为A列及E列上样,需要加24个孔,一般配Mix时需要多配2个孔,我们按26个孔的量,除cDNA(1μL)后需配置余下体系。 准备一个EP管,按...
将Rt-qPCR所需要的试剂如:无酶水,SYBR,上下游引物等以及样品(cDNA)置于冰上备用。 03混合无酶水、SYBR、上下游引物 根据以上点样规划,计算每种引物所在位置孔位数,如内参基因为A列及E列上样,需要加24个孔,一般配Mix时需要多配2个孔,我们按26个孔的量,除cDNA(1μL)后需配置余下体系。 准备一个EP管,按...