确保目的基因序列的准确性是至关重要的,因为任何突变都可能影响后续的表达结果。 二、载体质粒选择 选择适当的载体是构建成功的关键。常用的载体有质粒、病毒载体等。在选择载体时,应考虑其容量、复制能力、插入位点等因素,以确保目的基因能够高效地导入宿主细胞并稳定表达。 三、限制性内切酶处理 限制性内切酶是一种...
还可以通过分子挂钩来招募转录激活因子到dCas9周围达到增强基因表达目的，如：将SunTag短肽（含多拷贝的GC...
C.用PCR检测J基因连接到质粒中且方向正确可选用的一对引物是F1和R2 D.若J基因转录的链位于b链,可知引物F1与基因J的b链相应部分序列相同 23-24高三上·浙江·阶段练习 查看更多[6] 更新时间:2023/10/12 08:52:37 纠错 收藏 下载 加入试题篮 【知识点】 PCR扩增的原理与过程解读 基因表达载体的构建解读 ...
科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒,该质粒的部分结构如图所示,其中J基因序列表达J蛋白,V5编码序列表达短肽V5。下列叙述错误的是() A.作为基因表达载体,该重组质粒通常还需具有标记基因等结构 B.用F2、R2作引物进行PCR检测,可确定J基因插入方向是否正确 ...
1利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体,即将目的基因整合到土壤农 杆菌的Ti质粒上。 2将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内。 3利用土壤农杆菌感染植物细胞,该过程实际上是将含有目的基因的 土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内。 4含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后,可以把自己的 一段基因整合到细胞核...
(2)在构建基因表达载体时,常用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒,获得不同的黏性末端,其主要目的是防止___和反向连接。 (3)将重组质粒导入植物细胞中常用的方法是___。我国科学家将重组质粒导入棉花受体细胞所用的方法是___。 (4)重组细胞经过G、H过程成功地培育出了转基因抗病毒马铃薯植株,此过程涉及植物...
许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因,其编码的产物β半乳糖苷酶在Xgal和IPTG两种物质存在时,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色.基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如图所示. (1)构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达...
许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ’基因,其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如下图。下列说法错误的是( )A.基因工程中,构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中...
双荧光素酶报告基因检测原理(1) 构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒,如pGL3-basic等;(2)将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此转录因子能够激活靶启动子,则荧光素酶基因就会表达,荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比;(3)...
方法,取得目的基因的适宜的载体,即质粒(一种环状双链DNA)或病毒;第三步:DNA的体外重组;第四步:DNA重组体导入受体细胞;第五步:受体细胞的繁殖扩增: 含重组DNA的活受体细胞,再在适当的培养条件下,进行繁殖和扩增,使得重组DNA分子在受体细胞内的拷贝数大量增加;第六步:克隆子的筛选和鉴定;第七...