TN5 转座酶可以用于基因克隆和测序等技术。帮助科学家获取特定的基因片段。它在微生物研究中有着广泛的应用。能够揭示微生物基因的功能和调控机制。转座酶还可以用于构建突变体库。 为基因功能的研究提供丰富的材料。TN5 转座酶介导的转座事件可以引发基因表达的改变。进而影响生物的表型。对转座酶的研究有助于理解生物...
当DNA进行复制或转录时,折叠结构会被打开形成可接近的区域,ATAC-seq技术利用Tn5转座酶切割暴露的DNA,使其连接上特异性的Adapters,插入Adapters的DNA片段可被分离出来用于二代测序,从而获得大量的细胞系和组织样本基因表达、转录调控、转录修饰等的信息。相对其他如MNase-seq,FAIRE-seq和DNase-seq等染色质研究方法来说,A...
在 ISSAAC-seq中,首先使用带有通用Nextera接头的Tn5转座酶(R1,R2)插入标记染色质开放区域,这种带有通用Nextera接头的Tn5转座酶常用于典型的scATAC-seq实验;随后添加一段引物(这段引物包含部分的Truseq接头R2序列、10 bp的UMI分子标签,以及poly-T序列)用于核内的逆转录反应;随后,使用一侧包载有Nextera接头R1...
pA-Tn5转座酶在此领域的应用,使得从单个细胞中获取转录组信息成为可能。黄岩谊课题组和谢晓亮课题组联合清华大学王建斌课题组开发的基于Tn5转座酶的转录组测序快速建库方法,特别适用于单细胞转录组测序,大大简化了建库过程,减少了样本用量,并提高了测序质量和速度。 四、pA-Tn5转座酶的优势 高效率的DNA片段化:pA-Tn5...
在ISSAAC-seq中,首先使用带有通用Nextera接头的Tn5转座酶(R1,R2)插入标记染色质开放区域,这种带有通用Nextera接头的Tn5转座酶常用于典型的scATAC-seq实验;随后添加一段引物(这段引物包含部分的Truseq接头R2序列、10 bp的UMI分子标签,以及po...
Tn5转座复合体酶切并加上接头的原理如下: 1. 利用Tn5转座酶结合在开放性染色质上,将其剪切后并加上自带的接头。 2. 利用转座酶结合在DNA两端反向重复序列,并选择性地识别靶点DNA上的ATRich序列,使其嵌入DNA单链,从而引起DNA序列的转移和突变。 3. 转座酶先与DNA发生稳定结合,然后结合一些辅助蛋白,切断DNA双...
tn5转座酶在联合多组学研究中的应用主要包括以下几个方面。 tn5转座酶在基因组测序中的应用。基因组测序是联合多组学研究的基础,可以揭示生物体的基因组结构和序列信息。tn5转座酶可用于将DNA片段随机插入到待测序的基因组中,从而构建测序文库。与传统文库构建方法相比,tn5转座酶具有高效、快速和无需特定引物的特点,...
在ISSAAC-seq中,首先使用带有通用Nextera接头的Tn5转座酶(R1,R2)插入标记染色质开放区域,这种带有通用Nextera接头的Tn5转座酶常用于典型的scATAC-seq实验;随后添加一段引物(这段引物包含部分的Truseq接头R2序列、10 bp的UMI分子标签,以及poly-T序列)用于核内的逆转录反应; ...
Tn5转座酶建库原理.pptx,Tn5转座酶建库原理Tn5转座酶是一种强大的工具,用于构建用于下一代测序(NGS)的DNA文库。 它通过在基因组DNA中插入接头序列来实现这一目标。hdby h d Tn5转座酶的结构和功能结构Tn5转座酶是一个由两个亚基组成的蛋白质,每个亚基都包含一个 DNA 结
在1月27日,由北京大学的黄岩谊课题组和谢晓亮课题组联合清华大学王建斌课题组合作完成,开发了一种新的基于Tn5转座酶的转录组测序快速建库方法,以红酒的名字来命名,并起名为SHERRY(Sequencing HEteRo RNA-DNA-hYbrid )。与已有的转录组测序相比,不需要cDNA二链合成,大大简化了建库的过程 ;而且只需要微量的样本就可以,...