条带轻度拖尾、弥散现象,如果样本没有问题,那可以考虑一下胶的问题。参考marker,marker如果也出现拖尾等现象,是否你的胶放置太久(自己配置的超过1周,且保存不当),配胶步骤是否出了问题。 解决办法:换一块新配置的胶试一试。 3)原因三:电压、电泳液、电极芯等问题 条带轻度拖尾、弥散现象,考虑电压、电泳液、电极...
【实验】SDS-PAGE蛋白凝胶电泳的基本原理,操作方法,注意事项,制胶,上样,跑胶,观察,拍照,蛋白胶,保姆级教程, 视频播放量 60163、弹幕量 146、点赞数 1369、投硬币枚数 494、收藏人数 2927、转发人数 925, 视频作者 植物百科, 作者简介 一个实验型up,偶尔猎奇。,相
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳 详细资料如下:聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由shapiro建立,他们发现在样品...
1双向电泳第二步SDS-PAGE跑胶的问题主要有2个问题:第一:跑出来的胶有很多的横着竖着的条带,不知道是蛋白没有分开还是怎么的.看Bio-Rad上面写的问题分析说可能是蛋白被污染了,所以加了DNAse I和RNase A在最开始的蛋白里面,不过效果还是不好,依然有很多条带.第二:把第一条strip放在成品胶(SDS-PAGE的那个胶)...
5、准备好后开始配胶。水、30%聚丙烯酰胺、TRIS酸加好后就要混匀一下,加了AP、SDS后也要混匀一下,混匀时要尽量避免产生气泡。最后加TEMED后混匀约1分钟,混匀是要把枪调到1000,混匀是上吸要注意不要吸空。 6、加入玻璃板,加入时尽量不要有气泡,加到夹子中间绿柱子的下缘处,如果你有把握玻璃板不漏,可以...
在蛋白纯化过程中，SDS-PAGE跑胶的问题对新手来说无疑是一个挑战。我亲身体验过这个“难题”，耗时半学期才逐渐掌握。问题的复杂性主要源于信息的缺乏和自身理解的不足。遇到样本挂孔、条带拖尾和弥散的情况，通常可以从以下几个方面寻找原因：首先，上样浓度问题不容忽视。过高的样本浓度可能导致挂孔，...
1、看这个图，感觉制的胶还行，至少marker跑出来了；看看跑胶的溶液是不是很长时间没换了；2、对照和...
解析 你好,SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严。我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可希望有所帮助,不懂可以追问,有帮助请采纳 ...
很简单的问题,原因也很简单,做胶的时候不注意细节。这种情况一般出现在拔底面spacer(大板胶通常有底部的封条)和样孔梳子的时候。原因有四种可能:1. 梳子过紧。梳子或底边spacer的宽度和两边spacer的宽度有极细微的差别(质量不合格或不配套),使得勉强用力拔梳子的过程中,造成玻板的错动。通常除梳孔漏样外,玻板底...
SDS-PAGE 跑DNA 需要泡到EB里面 然后上紫外光源才能看到DNA条带 在正常光源下，胶上只有marker和溴酚蓝 超声的破胞效果通常不太好，估计可能是细胞没破，或者破的太少 你参考下 蛋白质样品的制备 细胞全蛋白质提取(裂解液+超声波)将处理一细胞培养瓶中的培养基倒入15ml离心管中，用PBS洗涤培养瓶2...