条带轻度拖尾、弥散现象,如果样本没有问题,那可以考虑一下胶的问题。参考marker,marker如果也出现拖尾等现象,是否你的胶放置太久(自己配置的超过1周,且保存不当),配胶步骤是否出了问题。 解决办法:换一块新配置的胶试一试。 3)原因三:电压、电泳液、电极芯等问题 条带轻度拖尾、弥散现象,考虑电压、电泳液、电极...
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳 详细资料如下: 聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,…
5、准备好后开始配胶。水、30%聚丙烯酰胺、TRIS酸加好后就要混匀一下,加了AP、SDS后也要混匀一下,混匀时要尽量避免产生气泡。最后加TEMED后混匀约1分钟,混匀是要把枪调到1000,混匀是上吸要注意不要吸空。 6、加入玻璃板,加入时尽量不要有气泡,加到夹子中间绿柱子的下缘处,如果你有把握玻璃板不漏,可以...
在蛋白纯化过程中，SDS-PAGE跑胶的问题对新手来说无疑是一个挑战。我亲身体验过这个“难题”，耗时半学期才逐渐掌握。问题的复杂性主要源于信息的缺乏和自身理解的不足。遇到样本挂孔、条带拖尾和弥散的情况，通常可以从以下几个方面寻找原因：首先，上样浓度问题不容忽视。过高的样本浓度可能导致挂孔，...
1双向电泳第二步SDS-PAGE跑胶的问题主要有2个问题:第一:跑出来的胶有很多的横着竖着的条带,不知道是蛋白没有分开还是怎么的.看Bio-Rad上面写的问题分析说可能是蛋白被污染了,所以加了DNAse I和RNase A在最开始的蛋白里面,不过效果还是不好,依然有很多条带.第二:把第一条strip放在成品胶(SDS-PAGE的那个胶)...
灌胶完成后怎么跑胶呢?视频教你7步完成 Okay now that you know how to cast an SDS-PAGE gel, how exactly do you use it? Here, Dan shows you how to set up your apparatus to run SDS-PAGE — everything in 7 easy steps. WAIT!!
如何将SDS-PAGE跑好 1. 首先是配胶问题:为了防止PAGE过早聚合,最好你将配胶的试剂放在4℃条件下。另外,配胶时一定要充分混匀,。 2. 在制分离胶用水压线应该及时(在其聚合前),加水要均匀轻缓不能冲击太大。 3. 点样量不应太大,并且最好不用两边的胶孔,可加入等体积的loading。
有一点我用别人的分离胶缓冲液的时候分离胶跑1小时就到头了用我自己配的要跑1个半小时不知道和条带颜色浅有没有关系条带形状是正常的结果一 题目 SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?连着练了好几天了,每次都不出结果,用相同的样品在别人制的胶上面跑出来...
条带出现弯曲的情况，通常会让人联想到一个哭脸的形状，这种情况的出现主要有两个原因。首先，电泳缓冲液的不干净是导致条带弯曲的一个重要原因。电泳缓冲液是维持电泳过程稳定进行的关键因素，如果缓冲液含有杂质，可能会干扰蛋白质的迁移，导致条带弯曲。因此，使用高质量、干净的电泳缓冲液对于确保电泳...
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