在正式讲解Overlap Extension PCR操作前,为大家补充一下重叠延伸PCR的技术原理,重叠延伸PCR(也叫搭桥PCR)是一种经典的、巧妙的、快捷的将多个DNA片段搭接在一起的PCR操作技术。在清楚相关原理后更有助于在Snapgene软件中进行模拟操作。新学期的正确打开方式 知识 校园学习 教程 生物学绘图 搭桥PCR 重叠延伸PCR DNA ...
(1)PCR技术扩增目的基因的原理:DNA双链复制。结合前面的分析可知,应选用如图中的B和E作为引物最恰当。 (2)用两种酶切出目的基因和质粒来,可以防止目的基因和质粒自身环化和反向连接。 (3) 将重组质粒导入植物细胞中常用的方法是农杆菌转化法,我国科学家将重组质粒导入棉花受体细胞所用的方法是花粉管通道法。 (...
(1)利用PCR从海鱼基因组中扩增抗冻基因需要添加一对特异性引物,目的是___;利用抗冻基因的mRNA逆转录后PCR也可获得抗冻基因。通过琼脂糖凝胶电泳,___(填“能”或“不能”)区分两种方法获得的抗冻基因,理由是___。 (2)选择图示Ti质粒构建基因表达载体,应选择限制酶___(填“I”或“Ⅱ”或“Ⅲ”),理由是_...
PCR扩增的原理与过程 题型:多选题 难度:0.65 引用次数:158 题号:23101719 分享 下图为基因工程部分操作步骤,质粒的外侧链为a链,内侧链为b链。基因Ampr转录的模板链属于a链的片段。ALDH2基因编码区首端到末端(其中一条链)的序列为5′-ATCCATGCGCTC…(中间核苷酸序列)…CAGTGAGTAGCG-3′。四种限制酶的识别序列...
(3)运载体:常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 (1)获得图1中目的基因的方法有PCR技术、从基因文库中获取、人工合成。 (2)采用PCR扩增目的基因的原理是DNA复制,由图2可知,DNA复制只能从3’到5’,因此构建前利用PCR技术扩增基因时,A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取A和D作为引物。 (3)a、...
(1)目前临床使用的乙肝疫苗是第二代疫苗.图中外衣壳蛋白A基因的大量扩增可通过PCR技术,需要用到的一种重要酶是耐高温的DNA聚合酶或Taq酶、2种引物.构建含基因A的重组质粒需要用到的工具酶是限制酶与DNA连接酶.(2)据信息和所学知识分析:第一代疫苗基本处于淘汰的原因是:有引起血源性疾病的嫌疑或浪费大量的血浆...
(1)PCR技术利用的基本原理是DNA双链复制;利用该技术扩增目的基因(子链的延伸方向从5→3)时,应选择图中的引物C和D与模板DNA结合。(2)在构建基因表达载体时,需要使用限制酶、DNA连接酶和运载体三种工具。(3)分析图形可知,利用植物组织培养技术可将重组细胞经过G脱分化、H再分化过程成功培育出转基因抗病毒马铃薯...
【题目】 穿梭载体是一类具有两种不同复制原点、能在两种不同的生物体(物种不同)中复制的载体,一般在原核生物和真核细胞中都能复制和表达,如 Ti 质粒和哺乳动物表达质粒 pMT2 。回答下列问题。 ( 1 )构建基因表达载体前,需先获取目的基因。 PCR 技术可用于目的基因的扩增,其原理是 ___ 。用 PCR 技术从基...
现在美国某基因公司用如下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点。 (1)获取人干扰素基因的常用方法有从 或 中获取、PCR扩增、DNA合成仪合成,此基因在基因工程中称为 。 (2)此基因与质粒相结合要依靠 ,其作用部位都是磷酸二酯键,然后将重组DNA转移到酵母菌体内,受体细胞选择酵母菌而不是大肠杆菌的优势是 。 (...
分析 分析图解:图中过程①表示从细菌中获取运载体质粒,过程②表示获取目的基因(凝乳酶基因),过程③表示基因表达载体的构建,过程④表示目的基因导入受体细胞,过程⑤表示目的基因的检测与鉴定. 解答 解:(1)过程②表示获取目的基因(凝乳酶基因),从小牛体内提取的凝乳酶基因通常需要通过PCR技术进行扩增,该技术的原理是DNA...