一、质粒电泳跑胶出现两条带的原因 质粒被切割:如果质粒被切割,它可能会显示两条带,一条是超螺旋质粒,另一条是线性化的质粒。 DNA破坏:如果提取裂解步骤过于剧烈,也可能会导致质粒DNA的破坏,从而产生两条带。 PCR扩增:如果引物特异性不够强,或者有非特异性扩增,也可能在PCR电泳中出现双条带。 二、质粒电泳跑...
因此,在选择凝胶浓度时,需要根据实验目的和重组质粒的DNA分子量进行适当调整。 三、电泳条件对条带长度的影响 电泳条件包括电场强度、电泳时间和电泳缓冲液等,这些因素也会影响重组质粒跑胶条带的长度。电场强度越大,DNA分子在凝胶中的迁移速度越快...
2. 上样与电泳:将提取的质粒DNA与上样缓冲液混合后,加入凝胶孔中,进行电泳。 3. 观察条带:电泳结束后,在紫外灯下观察凝胶中的DNA条带。 三、条带解读与问题分析 通过观察跑胶条带,可以判断质粒提取的效果及可能存在的问题。 1. 条带清晰度:清晰的条带表示质粒DNA纯度较高,提取效果...
正常状态下，质粒是环状双链DNA，多以超螺旋（supercoiled）的形式存在。超螺旋的质粒跑胶的条带会类似...
解析 胶没配好(不均匀),要不就是电泳的时候胶没放整齐(打斜了). 结果一 题目 同样的质粒,点在不同的道上,跑胶之后条带不在同一水平线上是怎么回事? 答案 胶没配好(不均匀),要不就是电泳的时候胶没放整齐(打斜了). 相关推荐 1 同样的质粒,点在不同的道上,跑胶之后条带不在同一水平线上是怎么...
别人给的质粒,看他们的文献,双酶切之后有两条,分别是490bp(目的基因的大小)和5400bp.现在,我打算把他们寄来的质粒直接去跑1%的琼脂糖凝胶电泳,先不进行双酶切,用10000的marker够了吧,如果有条带的话,也是这两条吗?还是别的情况呢?另外,他寄来的质粒是200ng/ul的,但是 只有一点点的量大概5ul 我做了2...
因为质粒在跑胶的时候会有部分的散开，有的是片段。还有的是由于质粒形态上的，比如超螺旋跑的会比较快，所以跑出四条也是正常的，但是一般别的条带都比较暗，只有一条会比较亮，那个才是质粒的所对应的碱基数。
解析 只要制备胶等过程都没问题,marker也跑出条带了,那这种情况最有可能的原因还是质粒的浓度过低.所以,虽然OD值可测出来,但胶显示不出来,我就遇到过这样的情况,还算很普通的现象.下次再加大菌量就行.结果一 题目 为什么提取质粒测出来OD值了,跑胶没有条带? 答案 只要制备胶等过程都没问题,marker也跑出条带了...
双酶切胶回收后片段浓度大概多少 如果你是测紫外定浓度,来判断酶切是否完全,这个方法是不靠谱的.只能大致判断你的回收效 质粒dna在琼脂糖凝胶中应为一条带,但有时出现三条带的原因有... 但通常跑胶会看到三条,这是正常情况。因为质粒是环形的DNA,稍有降解就会变成一条为线性,再厉害些,就成了线性DNA,三者在...
会上移。质粒浓度高，DNA分子量大，电荷密度大，迁移率低，所以在电泳过程中会受到较大的阻力，导致迁移速度变慢，从而跑出的条带会上移。质粒浓度高并不是唯一影响DNA迁移速度和跑胶条带位置的因素，还有其他因素如电场强度、凝胶浓度、电泳时间等也会对结果产生影响 ...