一、质粒电泳跑胶出现两条带的原因 质粒被切割:如果质粒被切割,它可能会显示两条带,一条是超螺旋质粒,另一条是线性化的质粒。 DNA破坏:如果提取裂解步骤过于剧烈,也可能会导致质粒DNA的破坏,从而产生两条带。 PCR扩增:如果引物特异性不够强,或者有非特异性扩增,也可能在PCR电泳中出现双条带。 二、质粒电泳跑...
解析 如果是刚抽出来的质粒,好的只有一条带:超螺旋条带如果提取裂解步骤过于剧烈,则会出现两条带:超螺旋和开环质粒有时候会出现三条带:超螺旋、开环质粒和复制中间体结果一 题目 质粒DNA经电泳后图上为什么只有两条带 答案 如果是刚抽出来的质粒,好的只有一条带:超螺旋条带如果提取裂解步骤过于剧烈,则会出现...
前几次载体和目的片段的质粒同时提取,但是载体质粒浓度较低,回收后条带更低,这次浓度提高了很多,但是出现问题---电泳15分钟出现两条带(较淡),大的在前约5000(清晰),小的在后约3800,拍照保存后,继续电泳12分钟,在前两条带的基础上会出现第三条更大的条带较淡.想问一下可否继续酶切 对后续实验有无影响 ...
两条带算是好的啦,我做的时候还有3条带呢,因为质粒有SC(超螺旋,也就是双链闭合而且构成超螺旋结构)、OC(开环,也就是双链闭合环状中有一条链开环或者两条都开环)、L(线性)这3中构型,同等分子质量在电泳的时候SC跑的最快,L次之,OC最慢,所以你要根据你的质粒的分子质量来判断那两条带分别是什么。中洪...
两条带算是好的啦,我做的时候还有3条带呢,因为质粒有SC(超螺旋,也就是双链闭合而且构成超螺旋结构)、OC(开环,也就是双链闭合环状中有一条链开环或者两条都开环)、L(线性)这3中构型,同等分子质量在电泳的时候SC跑的最快,L次之,OC最慢,所以你要根据你的质粒的分子质量来判断那两条带分别是什么。中洪...
其次是环状质粒,最后是线性质粒。所以质粒经过电泳后会出现两条带,甚至三条带都是正常的。
质粒直接电泳,有时会有多条带,原因是其不同形态,比如有超螺旋、单链缺刻、双链缺刻等等。如果提取...
建议:首先电泳时要有原质粒作对照,这样你就可以确定跑得快的带是不是未完全切开的质粒了.其次想酶切完全,可延长梅切时间,看你的体系酶的量足够了,而且酶的量本身也不应大于1/10;只是不知梅切的时间.最后若是可以确定两条带中有一条是切开的,则可以利用胶回收纯化的方法得到所需的这一载体,在和目的片段连接...
仔细看了下,124也是两条带,只是后面那条量少,不易观察。如果24是处理后的,我感觉前面那条带的电泳迁移率是有变化的,说明你用的化合物跟质粒有相互作用。质粒有两条带时不好准确判断是哪两条,建议你用个单一切点的酶处理一下质粒,也就是让它产生线状DNA,然后作为对照就知道样品里的两条带是哪两条了。
解析 正常 两条三条都正常 结果一 题目 提质粒之后跑电泳发现两条带,用的欧米伽的试剂盒,这种情况是什么问题,可以测序么? 答案 正常 两条三条都正常相关推荐 1提质粒之后跑电泳发现两条带,用的欧米伽的试剂盒,这种情况是什么问题,可以测序么?反馈 收藏 ...