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[5] 通过分离健康人血 浆中的8~24个核苷酸的RNA,构建了小RNA文 库,对得到的25个DNA克隆进行测序分析,在所 采用的血浆样本中克隆到包括let-7a miR-6和 miR-5b等在内的37种miRNA分子,并发现miR- NAs能以一种非常稳定的形式存在于人体血浆中, 以保护其免受内源性RNase的降解同一时间, Chen等 [6] 通过...
无明显改变,说明血清中内源的miRNA 可以逃脱核 在25 例前列腺癌患者血 清中均高表达,可以达到 [22] 糖核酸酶的消化。Chen 等 发现A549 细胞提取物 60% 的敏感性、100% 的特异性,并且与前列腺特 中的大分子RNA,如18S rRNA、28S rRNA、 异性抗原PSA 的表达水平有一定 ...
阿兹海默症(AD)是一种最常见的痴呆病症,其特征在于淀粉样蛋白β (Aβ)斑的积累和神经元纤维缠结的形成,目前还没有可靠的生物标记或非侵入性技术可用于早期检测AD。 microRNA(miRNA)是一类长度为21-25nt的内源性小非编码RNA。越来越多的证据表明,特定miRNA水平的改变与多种疾病有关,因此这些miRNA可以作为诊断...
基于血清外泌体的检测有应用于临床早期非小细胞肺癌筛选的潜力,甚至有可能代替传统影像学的检测[20]。由于细胞的积极分泌,几乎在所有的体液中都能够检测到循环外泌体,比如外周血、尿液、唾液、脑脊液甚至于母乳中[21,22,23,24,25]。研究表明外泌体包裹的miR-181b-5p、miR-30a-3p、miR-30e-3p和miR-361-5p在...
(2)miR-107/miR-1246的检测: ①按照得到的RNA+逆转录缓冲液5μl+逆转录酶1μl+2.5U/μl聚合酶1μl+去RNA酶水补足到25μl。 ②37℃水浴60min;85℃水浴5min后放于冰上,得到的microRNA cDNA。 ③cDNA2μl+2xqPCR混合液10μl+上下游引物(2μM)2μl+通用引物(2μM)2μl+DDW4μl。 ④预变性95...
24、(2)用mirneasy血清/血浆升级版试剂盒(mirneasy serum/plasma advancedkit),按照厂家(qiagen)提供的使用说明来抽提总rna,用qubit 4.0荧光定量仪来定量检测其浓度。 25、三、real-time pcr方法测量血清mirnas表达量 26、1. 取经前处理的血清,通过rna逆转录反应得到cdna样品;按下表所示配制反转录体系 : ...
成都华西华科研究所研发糖尿病早期无创检测诊断系统研究微小RNA(miRNAS)是一类小分子非编码调节其在血浆或血清的稳定存在,可作为特异的生物标志物反映机体生 理或病理变化。血清miRNAs比其他生物学标志物更为灵敏和特异,在2型糖尿病和姓娠糖床病早期诊断中具有诊断价值,可 用于糖尿病分类,评估疾病发展程度,监测治疗效果...
miR-25的序列是:CAUUGCACUUGUCUCGGUCUGA; miR-451的序列是:AAACCGUUACCAUUACUGAGUU。 任何一个血清microRNA分子标志物作为检测白癜风时的应用。 任何一个血清microRNA分子标志物作为制备具有白癜风检测能力试剂盒的应用。 一种具有白癜风检测能力试剂盒,其特殊之处在于:所述具有白癜风检测能力试剂盒包括反转录系统、...
(2)植物组织:新鲜的叶、果肉、种子最少100mg,保存于-80℃或者液氮。 2、细胞样本: 细胞量要求:每个实验组细胞数量保证大于106以上;6孔板70-80%;T25培养瓶70-80%。根据检测指标难易、RNA表达丰度不同以及检测指标数量多少,细胞要求数量会相应变化。这