Pull-down蛋白质鉴定技术步骤(图片来源:百泰派克生物) Pull-down实验的具体步骤: 1. 表达纯化GST、polyHis或Biotin标记的诱饵蛋白; 2. 使用固定化亲和配体将诱饵蛋白与固相基质稳定结合; 3. 再将诱饵蛋白与待测细胞裂解液进行混合孵育,在这一过程中,诱饵蛋白与目标蛋白相互作用并结合在一起,通过清洗除去非特异性结...
Pull-Down技术是一种通过特异性亲和作用来捕获和鉴定蛋白质相互作用的方法。其基本原理是利用特定的亲和剂（例如抗体或结合结构域）与目标蛋白质特异性结合，并通过固定在固相上的亲和剂来分离和富集与之相互作用的蛋白质。2.Pull-Down技术的步骤 （1）样品准备：从细胞或组织中提取待研究的蛋白质样品，并进行适当的...
Pull-Down技术可以帮助我们构建蛋白质相互作用网络,揭示蛋白质之间的相互作用关系。通过大规模的Pull-Down实验和鉴定,可以获得蛋白质相互作用的全局视角,帮助我们了解细胞内复杂的蛋白质网络。此外,该技术还可用于鉴定与特定蛋白质相互作用的配体、亚基或调节因子,并深入研究其功能和调控机制。 3.Pull-Down技术在解析信号...
小分子药物(Small Molecule SM)Pull-down技术是化学蛋白质组学用于小分子靶点发现、创新药物先导化合物筛选等研究的先进技术,钟鼎生物结合了小分子SM Pull down、MST(超链)、结合复合物质谱解析三大技术平台,为您解决化学蛋白组学问题。
Pull-down 技术, 也叫蛋白质体外结合实验, 是一种行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术。 ▼实验原理 将靶蛋白-GST 融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽标记的珠子上, 作为与目的蛋白亲和的支撑物, 充当“诱饵蛋白”, 目的蛋白溶液与之孵育, 可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白), 洗脱结合物后通过 ...
蛋白质相互作用是细胞内生物分子之间的重要交流方式,对于维持正常细胞功能和调控生物过程至关重要。研究蛋白质相互作用可以帮助我们了解细胞内的信号传递机制、发现新的药物靶点,并解析疾病发生的分子机制。Pull-Down技术作为一种常用的蛋白质相互作用研究方法,已经在科学研究和药物研发领域中发挥了重要作用。本文将详细介绍...
Pull-down技术(也称蛋白质体外结合实验)是一种行之有效的验证酵母双杂交系统的体外实验技术(Wissmueller et al., 2011)。早在1988年, Smith和Johnson (1988)就利用谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase, GST)融合标签从细菌中一步纯化出GST融合蛋白。从此GST融合蛋白便在蛋白质相互作用研究领域得到极大地推广...
然后通过蛋白印迹(westernblot,WB)技术分别使用诱饵蛋白抗体和目的蛋白抗体对沉淀中的蛋白质进行检测,若能够检测到沉淀中同时存在诱饵蛋白和目的蛋白,则说明这两种蛋白之间存在相互作用。 图1 Co-IP 原理示意图 GST pull-down: GST,全称glutathione-S-transferase,即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,能够和谷胱甘肽(Glutathione,GSH...
蛋白质组和生物质谱-Pull-down靶蛋白质谱鉴定-技术服务-详情 在生物体的生命活动中,蛋白质的功能是通过蛋白质与蛋白质之间的相互作用来实现的。因此,研究新的蛋白互作可以为研究蛋白质的潜在功能提供新的方向。在诸多蛋白互作鉴定实验中,Pull-down常用于体外蛋白互作检验,以及帮助发现新的互作蛋白。Pull-down实验利用...
1.确定蛋白质复合物组成:通过co-ip pull down技术可以鉴定蛋白质复合物中的成员,并揭示复合物的组装机制和功能调控网络。 2.分析蛋白质与DNA/RNA的相互作用:co-ip pull down技术可用于研究蛋白质与DNA/RNA的结合,帮助解析转录因子、核酸修饰酶等与核酸相互作用的机制。