蛋白-蛋白相互作用是指两种或多种蛋白质之间的相互作用。这种相互作用可以通过多种机制发生,包括直接接触,共同递交的信号分子,与相同的DNA序列结合等。这些相互作用对于生物体内几乎所有的生物过程都至关重要,包括细胞信号传导、蛋白质合成、酶催化、细胞分裂、DNA修复等。在生物学研究中,蛋白-蛋白相互作用是理解生物过程...
蛋白质-蛋白质相互作用是生物体重要的生命过程之一,涉及到细胞信号转导、细胞结构组装、抗原-抗体识别等诸多生理现象。 要研究蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-Protein Interaction,PPI),通过高通量手段挖掘出潜在的PPI对,之后再去确认PPI对的相互作用强弱以及生理功能,是一种可能的思路,那么,都有什么方法可以挖掘潜在的...
首先在Input蛋白中可以用UCHL3的抗体检测到UCHL3;其次,在FOXM1抗体下拉的蛋白物中也可以用UCHL3的抗体检测到UCHL3。结果满足上述两个条件,则说明FOXM1和UCHL3之间存在相互作用。 No.2 GST pull-down 2.1、技术原理 Pull-down技术的核心在于,将目标蛋白质固定在一种基质(譬如Sepharose)上。当细胞提取液通过这种...
另一方面,与疾病密切相关的蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)的界面区域缺乏明确的配体结合口袋(ligand-binding pocket),并且不存在酶催化活性位点(active site)中常见的高度活化氨基酸残基,因此,开发以PPI为靶点的共价抑制剂...
结果解读:①用FOXM1蛋白的IP级抗体拉蛋白FOXM1,因为存在互作,还有其它蛋白会被拉下来。在WB检测时,下拉蛋白中能用FOXM1的抗体检测到FOXM1;②验证FOXM1和UCHL3是否有相互作用。首先在Input蛋白中可以用UCHL3的抗体检测到UCHL3;其次,在FOXM1抗体下拉的蛋白物中也可以用UCHL3的抗体检测到UCHL3。结果满足上述两个条件...
蛋白-蛋白相互作用研究方法的原理
CoIP其实就是两个蛋⽩相互的IP(免疫沉淀反应)实验,在已知蛋⽩B和C之间有相互作⽤的前 提下,这种前提⼀般需要有⼀个酵母双杂实验或者Pulldown实验来作为⽀持。IP就是⽤来验证 蛋⽩C和蛋⽩B之间相互作⽤的。如果在Agarose珠上的Protean A/G所结合的抗体,可以结合并 拉下蛋⽩B,那⽤...
本策课程打通了转录因子-DNA相互作用与蛋白-蛋白相互作用两种分子交互套路,呈现一套蛋白-蛋白-DNA的三元交互关系。因为转录调节过程中不仅有直接跟DNA结合的蛋白,还有一些转录辅助因子,它们虽不直接结合DNA,但是却可以结合转录因子,同样产生转录调控的作用。