对于蛋白质的分离和纯化,常常采用反相色谱法,因为蛋白质本身具有丰富的氢键和疏水性等特性,可以与填充物表面发生相互作用,从而实现分离和纯化的目的。 具体的实验步骤如下: 第一步:样品制备。将待测蛋白样品以适当浓度溶于纯化缓冲液中,并进行前处理,如除去酶或其他杂质。 第二步:液相色谱柱的选择。根据所需要纯化...
通常情况下,液液相平衡曲线呈现出一个S形状的曲线,曲线上半段表示半成分的蛋白质分布在水相中,而曲线下半段则表示半成分的蛋白质分布在有机相中。 蛋白质液液相分离可以通过调节介质的pH值来实现。在pH值低于蛋白质的等电点时,蛋白质通常呈现出正电荷,而在高于等电点时则呈现出负电荷。因此,通过控制溶液中的...
2022年12月19日，无膜细胞器与细胞动力学教育部重点实验室姚雪彪教授和刘行教授联合攻关团队在Nature Cell Biology杂志上在线发表了题为Phase separation of EB1 guides microtubule plus-end dynamics的研究论文，揭示了液液相分离驱动EB1蛋白形成纳米催化器的物理化学机制，解析了从酵母到人进化上保守的EB1相分离的化学...
作者观察到,在拥挤的条件下,无须添加额外的激活结合伴侣(如VnDR)Tn2与β1D肽也能单独形成液体状液滴;当Tn1和β1D混合时,没有观察到相分离;Tn2S339L的突变导致talin2对β1D结构域亲和力增加,大大减少了富蛋白相的体积,这证实了液...
蛋白质液-液相分离(LLPS)是细胞内多种功能的基础,对于分析细胞功能、治疗疾病和设计新型生物材料具有重要意义。研究者们已经识别出多个推动蛋白质LLPS的序列特征,并将其概括为LLPS的“分子语法”。本文进一步探…
生物大分子相变是近年来生物学领域新兴的研究热点,生物大分子通过液-液相分离(Liquid-Liquid Phase Separation,LLPS)可动态组装成无膜细胞器,执行多种重要生物学功能。大多数参与相分离的蛋白质均含有低复杂度区域或天然无序区域,它们的异常液-液相分离及液-固相转变可导致疾病发生。 Tau蛋白作为一种无序蛋白,在...
液-液相分离(liquid-liquid phase separation, LLPS)在细胞中表现为在稀释环境下形成致密的滴状结构,当大分子如蛋白质或核酸间的相互作用强于溶剂时更易出现,尤其在特定的浓度、温度、盐浓度和pH条件下更为明显(图1B)。LLPS在细胞内的...
蛋白质相分离广泛存在于细胞中，驱动多种重要的生物学功能。“液液相分离”不仅在生理过程中扮演重要的角色，而且与人类多种重大疾病的病理过程密切相关。非受体酪氨酸磷酸酶SHP2在RAS/MAPK信号通路传导中起关键作用。SHP2蛋白的突变与多种人类疾病有关，50%的努南综合症和90%的豹皮综合症患者携带SHP2的胚系杂合突变...
介导蛋白质液液相分离的结构域可以分为两类:一类是N-端富含亲疏水性氨基酸序列(N-rich),另一类是C-端富含亲疏水性氨基酸序列(C-rich)。这两类结构域具有不同的特点和功能。 N-rich结构域通常富含亮氨酸、丙氨酸和精氨酸等氨基酸,能够在高浓度下形成相对稳定的液滴,并在细胞内参与了许多重要的生命活动,如RNA加...
Plant Cell在线发表了题为The P-body component DECAPPING5 and the floral repressor SISTER OF FCA regulate FLOWERING LOCUS C in Arabidopsis的研究论文，发现了P小体（Processing body, P-body）重要组分DCP5（DECAPPING 5）能够与花期抑制因子SSF互作，并通过蛋白液-液相分离（Liquid-liquid phase separation：...