1、质谱质量分析(MS):MS通过测量分子的质量来确定其质子化的分子离子(m/z值)。对于组蛋白修饰的研究,质谱质量分析可以用于确定修饰的类型和位置,因为不同的修饰会引入不同的质荷比。2、串联质谱分析(MS/MS):MS/MS进一步分解分子离子,提供更多的信息,包括修饰的具体位置和丰度。这是特别重要的,因为一...
常规蛋白质组学分析每个样本成本约500-1000元,而深度修饰分析费用可能翻倍。采用分级策略,先进行全局修饰谱分析筛选目标,再针对关键靶点进行定向验证,能平衡研究深度与经费预算。有课题组在研究糖尿病肾病时,先通过抗体芯片筛选出50个差异磷酸化蛋白,再选择其中10个进行PRM靶向质谱验证,既节省成本又确保结果可靠。 伦理...
常见的蛋白质翻译后修饰包括磷酸化、糖基化、乙酰化、甲基化和泛素化等。蛋白质翻译后修饰能赋予蛋白质组丰富的生物学功能,参与调节各项生命活动,如转录调控、细胞生长分化、蛋白转运以及胞间信号传导等。质谱分析蛋白质修饰就是利用质谱技术对翻译后修饰蛋白质进行鉴定,经翻译后修饰的蛋白质由于添加了相关的化学基团...
在peptides.xlsx文件中,每条肽段的修饰情况(如乳酸化)都在"Modifications (all possible sites)"列中明确标注,包括修饰类型、数量和具体位置。例如,"2xLactylation "表示在肽段的第4和第5个氨基酸残基上发生了两次乳酸化修饰。这些数据可以直接用于确定蛋白质的翻译后修饰。此外,"# PSMs"列显示了每个肽段的谱图...
通过数据库搜索,可以确定蛋白质的序列信息以及糖基化修饰的位置。此外,通过对质谱图谱的进一步解析,可以获得糖基化修饰的细节信息,如糖链的类型和结构。质谱技术在糖基化修饰鉴定中的应用也存在一些挑战,例如糖肽的离子产生效率低,糖肽在液相中的离子化效率低,以及糖链多样性和异构体存在的问题。然而,通过使用...
蛋白质修饰的质谱峰啊,其实挺有意思的。简单来说,就是要看质谱图上的那些峰,它们能告诉你蛋白质发生了哪些修饰。 先看质谱图的整体,横坐标是肽段的质荷比(m/z值),纵坐标是质谱信号强度。峰越高,说明那个质荷比的离子越多。 接着,你要留意那些特别的峰,它们可能代表蛋白质上的修饰。比如,某个氨基酸被氧化...
组蛋白修饰质谱分析的核心流程分为样本处理、酶解消化、质谱检测和数据分析四个阶段。样本处理需从细胞或组织中提取完整染色质,通过酸解或盐析法分离组蛋白,避免使用强变性剂破坏修饰结构。酶解消化阶段常采用胰蛋白酶或Glu-C蛋白酶将组蛋白切割为肽段,切割位点需避开常见修饰区域以确保肽段携带完整修饰信息。质谱检测环...
准确检测蛋白质的修饰状态是蛋白组修饰研究的关键环节。以下是几种常用的关键方法:2.1 质谱技术 质谱技术是准确检测蛋白质修饰状态的重要方法之一。通过质谱技术可以确定修饰的类型、位置以及修饰的丰度。质谱技术的发展使得蛋白质修饰的分析更加高效和精确。2.2 免疫沉淀 免疫沉淀是一种常用的靶向分析方法,通过特异性...
1.鉴定蛋白质修饰 蛋白质质谱鉴定可用来鉴定蛋白质的磷酸化、乙酰化、糖基化等修饰。 2.研究蛋白质功能 通过研究蛋白质的修饰,可以了解其功能和调控机制。 3.研究疾病机理 许多疾病与蛋白质修饰异常有关,如癌症、阿尔茨海默病等。 4.药物筛选 通过研究药物如何影响蛋白质修饰,可以进行药物筛选和开发。