1.药物浓度随时间的变化:我们观察到在不同的给药剂量下,药物浓度随时间呈现不同的变化模式。例如,在低剂量情况下,药物浓度在给药后快速上升并迅速达到峰值,然后缓慢下降至基线水平。而在高剂量情况下,药物达到峰值的时间相对较长,且持续时间更长。 2.药物浓度与剂量的关系:我们发现药物浓度与给药剂量之间存在正相...
选择适当的细胞接种浓度。一般状况下,96孔培育板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预试验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培育时间,以保证培育终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量...
对于一些常见的细胞系,通常可以在资料中找到推荐的药物浓度。例如Hela细胞用400 μg/ml的G41或1 μg/ml的嘌呤霉素进行稳定细胞株筛选。 用G418或潮霉素B,选用在5天左右出现细胞大批死亡,2周全部死亡的浓度作为筛选浓度。对于嘌呤霉素,通常采用在3-4天杀死全部细胞的浓度。不同批次的药物活性有一定差异。因此在...
根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记!否则,可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。 3. 时间点的设定。在不同时间点的测定OD值,输入excel表,最后得到不同时间点的抑制率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台期)那个时间点应该就是最好的时间点(因为这个时候的细胞...
,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。 %CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,-7个梯度,每孔100ul,设3-,否则难以反应真实情况. ...
在使用g418、潮霉素b或嘌呤霉素筛选稳定细胞系细胞之前,需要先通过梯度实验确定适合该类细胞的药物浓度。对于一些常见的细胞系,通常可以在资料中找到推荐的药物浓度。例如hela细胞用400 μg/ml的g41或1 μg/ml的嘌呤霉素进行稳定细胞株筛选。 用g418或潮霉素b,选用在5天左右出现细胞大批死亡,2周全部死亡的浓度作为筛...
MTT细胞实验中药物浓度筛选详解.pdf,MTT细胞实验中药物浓度筛选详解.pdf优质文档,你我共享。(一)实验前应明确的问题 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96 孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105 个细 胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行 MTT 试验
线性孵育时间是指随着孵育时间的延长，代谢产物的生成随之线性增加，用代谢产物的生成量与孵育时间作线性回归（比如设置5、10、15、20、30min等时间点）；底物浓度一般选动力学一系列浓度的较低浓度，Km和Vmax是酶动力学常数（如果动力学符合米氏动力学的话）。
筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记!否则,可能你用的 时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。 3.时间点的设定。在不同时间点的测定OD值,输入excel表,最后得到不同时 间点的抑制率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台 期)那个时间点应该就是最好的时间点(因为这个时候...
浓度梯度芯片是一种微流体芯片技术,其基本原理是在微小尺度上创建和操控溶液中的浓度梯度。这种技术在多个领域具有广泛的应用,为实验室研究和临床诊断提供了强大的工具。 浓度梯度药物筛选芯片 1 原理 浓度梯度芯片的核心原理是通过微通道中的混合和扩散来实现浓度梯度的形成。