选择适当的细胞接种浓度。一般状况下,96孔培育板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预试验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培育时间,以保证培育终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量...
1、在加入筛选药物前一天将细胞以50%密度接种到6孔板。第二天在培养基中按G418(0,50,1000,200,400,800μg/ml)或者嘌呤霉素(0,1,2.5,5,7.5,10μg/ml)加入。 2、用G418筛选处理5-10天。每2天观察细胞一次。每4天跟换新的有抗生素的培养基(如果有必要可以更换得更勤)。直到得到最佳浓度。 3、用嘌呤霉...
在使用G418、潮霉素B或嘌呤霉素筛选稳定细胞系细胞之前,需要先通过梯度实验确定适合该类细胞的最佳药物浓度。对于一些常见的细胞系,通常可以在资料中找到推荐的药物浓度。例如Hela细胞用400 g/ml的G41或1 g/ml的嘌呤霉素进行稳定细胞株筛
实验新手（大二）~最近在做耐药细胞，想了解一下如果单体药进行细胞给药，请问怎么筛选出合适的给药浓...
待分类 > 待分类 > 一种筛选合适药物浓度进行细胞培养的简便试验方法 打印 转格式 404阅读文档大小:84.39K2页btixj7acntjt..上传于2014-06-05格式:PDF
最近才学习做细胞实验，在肝癌细胞上筛选出药物的最适浓度，用什么指标决定药物的最适浓度。可以用MTT吗...
稳转细胞株是指经合适的药物浓度进行药物筛选后,得到外源DNA稳定整合到宿主染色体,并可以长时间表达外源目的基因的细胞。稳定表达细胞株弥补了瞬时感染(或转染)实验中外源基因表达时间短的缺陷,便于长期观察。稳转细胞的筛选需根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物,常用的抗性筛选有嘌呤霉素(puromycin)、...
本发明提供一种三维聚球培养腔模具和癌细胞化疗药物浓度的筛选方法,其中,所述三维聚球培养腔模具包括至少一个用于通过倒模制作细胞培养孔的模具柱,所述模具柱包括沿其倒模时的插置方向依次同轴连接的第一节段、第二节段和半球体,第一节段的轴向长度为半球体半径的20‑30倍,第二节段的轴向长度为半球体半径的10...
▐ Step 2 | 基于细胞实验的筛选流程 初筛 其中细胞活力/增殖是常用的方法之一,初筛建议先采用单一浓度进行筛选。 常用的是 10 μM 进行筛选 (如果细胞可以耐受较高的 DMSO 含量,初筛使用浓度也可以增加到 30 μM/50 μM; 注意做好 DMSO 溶剂对照!) ,对比抑制率/激活率或者根据化合物筛选的活性数据及数量...
蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMTs)在多个细胞过程中发挥重要作用,包括信号传导、基因调控以及蛋白质和核酸的运输,从而影响生长、分化、增殖和发育。PRMT5对底物蛋白上的精氨酸残基的两个末端ω-胍基氮原子进行对称二甲基化。PRMT5作为多聚体复合体的组成部分,与多种调节其功能和特异性的伙伴蛋白协同作用。这些复合体的核...