新型冠状病毒的检测主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测等几种方法。其中利用实时荧光RT-PCR技术检测新型冠状病毒特异性核酸序列是最常用的方法。RT-PCR是将逆转录(RT)、PCR以及荧光标记等相结合的技术。如图1为数字PCR技术的原理示意图。荧光的出现是荧光探针水解导致的,荧光探针将首先与模板DNA的相应区段结合(靶分...
新型冠状病毒肺炎(COVID-19),其病原体为严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2),是一种单链RNA病毒。新型冠状病毒的核酸检测采用“实时荧光定量RT-PCR”技术,通常在1~2 h内即可得到检测结果。此方法是PCR技术和荧光检测技术的结合,利用荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行检测分析。步骤如下图所示。
现有第五版新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案中,关于确诊病例需要两个病原学证据之一,其一是呼吸道标本或血液标本实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性,其二是呼吸道或血液标本基因测序,与已知的新型冠状病毒高度同源。综合考虑时间、费用尤其是病患较多等诸多情况,前者对于已感染病患的确诊来说尤为重要。 与此对应,...
到目前执行的2020年3月3日国家卫生健康委发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》,实时荧光RT-PCR方法检测SARS-CoV-2核酸一直是疑似病例确定为确诊病例的病原学依据之一[6-8],也是确诊病例出院标准的重要参考,为SARS-CoV-2感染的...
【题目】目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示,下列说法不正确的是() A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列 B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增 ...
新型冠状病毒的检测方法很多,实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)是目前核酸检测的主要方法,操作流程:采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。
如图为采用“实时荧光定量RT-PCR”技术检测新型冠状病毒核酸的基本流程,1～2h内即可得到检测结果。其基本原理是在DNA的复制过程中加入与特定模板链互补的荧光探针,这样
所建立的一步法多重巢式荧光RT-PCR方法可特异性检出新型冠状病毒和甲、乙型流感病毒,新型冠状病毒的最低检出限约为125拷贝/ml,甲、乙型流感病毒的最低检出限约为250拷贝/ml;检测101份各类呼吸道病原体阳性样本,显示新型冠状病毒和甲、...
正常新型冠状病毒核酸检测，如果没有感染是阴性的，如果是有感染的话，是阳性，那么也有的是检测igg和igm...
【题目】近期,以武汉地区为中心爆发了新型冠状病毒(2019-nCoV)病例,该病毒是具外套膜的正链单股RNA病毒。目前,对于该病毒的检测手段主要为利用荧光PCR试剂盒对其核酸进行检测。其原理是,通过提取病人样本中的RNA,进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR,即先通过逆转录获得cDNA,然后以其为模板进行PCR),通过扩增反应将样本...