荧光共振能量转移技术FRET:当两个融合蛋白之间的距离在5-10nm之间范围内,那么供体CFP发出的荧光可被YFP吸收,并激发YFP发出黄色荧光。现在可通过测量CFP荧光强度的损失量来确信这两个蛋白是不是彼此作用。两个蛋白距离越近CFP所发出的荧光被YFP吸收的就越多,检测器所接收到的荧光就越少。反之,就可不能产生FRET效应。
同时进行随 机突变以保留蛋白的折叠特性.最终得到的变体TagRFP具有很好的光物理学特性(表6),并且能在哺乳动 23 生命奥秘 www.lifeomics.com 物细胞中与多种蛋白融合表达(图22j).然而, 有些实验室发现其光稳定性不如原来描述的那样 高.Merzlyak等推测,当GFP和YFP作为供体时, TagRFP将成为极好的FRET受体,但这...
RS-GFP变体已被设计为具有轻微红移的光谱,使其成为FRET实验的宝贵工具。这也适用于黄色荧光蛋白(YFP),它发出黄光而不是绿光。也适用于黄色荧光蛋白(YFP),它发出黄光而不是绿光。 总而言之,GFP 变体允许微调蛋白质表达和定位研究。关于 GFP 抗体的特异性,差异可以忽略...
自GFP被首次用于标记基因后，水母来源的GFP不断被改造，得到了大量蓝色、青色和黄色的衍生物。同时，来自...