光转换荧光蛋白PA-GFP是首个用于光活化研究的光学指示剂,它源于Aequorea victoria水母的蛋白突变体。在基础设计中,野生型绿色荧光蛋白(GFP)被改造为阴离子态,形成PA-GFP。在常态下,野生型GFP有两个吸收峰,分别位于395和475nm,但通过突变,PA-GFP降低了对475nm的吸收,并几乎不吸收450~550nm的光线...
PA-GFP的光活化可以用来标记选定分子或整个细胞,并利用延时图像技术获取动力学特征。在理想状态下,只有活化的PA-GFP分子发射醒目的荧光,新合成的蛋白不会对实验造成影响。PA-GFP的光活化会比利用GFP进行光漂白研究的速度更快、现象更明显,而且用于光活化的激光强度要远小于FRAP的漂白激光,对细胞的杀伤...