首先将靶基因启动子或其他待研究基因调控元件插入到荧光素酶报告基因前方,构建成报告基因质粒。然后,将可以表达待检测转录因子质粒与报告基因质粒共转染细胞;如果此转录因子能够激活靶启动子,则荧光素酶基因就会表达,荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比;再加入特定荧光素酶底物,荧光素酶与底物反应,产生荧...
首先将靶基因启动子或其他待研究基因调控元件插入到荧光素酶报告基因前方,构建成报告基因质粒。然后,将可以表达待检测转录因子质粒与报告基因质粒共转染细胞;如果此转录因子能够激活靶启动子,则荧光素酶基因就会表达,荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比;再加入特定荧光素酶底物,荧光素酶与底物反应,产生荧光。通...
将荧光素酶报告基因载体转染到细胞中,可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。 1986 年萤火虫荧光素酶基因被用作测定基因表达的报告基因,获得广泛的应用。在荧光素酶的催化下,虫荧光素被氧化并释放一个光子。可用荧光检测仪 (比如, Turner DesignsTD-20/20, Promega 公司目录号 E2041) 及液闪计数...
传统报告基因检测系统中多数使用的是萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶检测体系,但底物需要在氧气、ATP等同时存在条件下才能被催化发光,其发光信号的半衰期较短,稳定性不佳等缺点,对实验结果和使用造成影响和不便。针对传统闪光型(flash type)荧光素的不足,圣生物经过潜心研究开发出新一代的操作更便捷、半衰期更长、稳定...
荧光素酶报告基因系统(Luciferase reporter)就是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。原理就是把启动子序列克隆到Firefly luciferase之前,用感兴趣的启动子去启动Firefly luciferase的表达。如下图,想要研究IFNa或者IFNβ的表达调控,就把IFNa或者IFNβ的启动子克隆到Firefly luciferase之前,内参就是用...
将荧光素酶报告基因载体转染到细胞中,可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。 1986 年萤火虫荧光素酶基因被用作测定基因表达的报告基因,获得广泛的应用。在荧光素酶的催化下,虫荧光素被氧化并释放一个光子。可用荧光检测仪(比如, Turner DesignsTD-20/20, Promega 公司目录号 E2041 )及液闪计数...
BPS Bioscience 两步荧光素酶检测系统 BPS Bioscience的两步荧光素酶检测系统,信号更稳定,步骤更简易,不需要稀释底物,可直接用于单个哺乳动物细胞样品高通量、快速定量Firefly和Renilla荧光素酶,灵敏度高且 - 艾美捷科技于20240903发布在抖音,已经收获了347.4万个喜欢
荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界能够发光的生物。自然界存在的荧光素酶来自萤火虫、发光细菌、发光海星、发光节虫、发光鱼、发光甲虫等。目前,以北美萤火虫(Photinus pyralis)来源的荧光素酶基因应用的最为广泛。该基因可编码550个氨基...
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化 luciferin 氧化成 oxyluciferin,在 luciferin 氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物...