腌制的泡菜往往含有大量的细菌,可利用“荧光素—荧光素酶生物发光法”对市场上泡菜中的细菌含量进行检测。荧光素接受细菌细胞中ATP提供的能量后会被激活,在荧光素酶的作用下形成氧化荧光素并且发出荧光,根据荧光强度可以计算出生物组织中ATP的含量。请分析并回答下列问题:(1)泡菜的腌制主要是通过乳酸菌发酵实现的,该...
rcfmin离心3min取上清液04ml检测时将肝匀浆液01ml加入重蒸水01ml稀释置入2ml的比色杯中放入fg200型发光光度计的暗室中从暗室盖的小孔中快速注入荧光素酶系缓冲液08ml所记录之发光曲线的初始峰值即为检测样品光强测定温度为25测定电压为05mv根据所得光强测定曲线上所占的小格数后在标准曲线上查出atp值 荧光素酶-...
荧光素酶在ATP的参与下,可使荧光素发出荧光.可利用“荧光素-荧光素酶发光法”来测定样品中ATP的含量.某研究小组对“测定ATP时,所需荧光素酶溶液的最佳
荧光素接受 ATP 提供的能量后就被激活,在荧光素酶的作用下形成氧化荧光素并且发出荧光; ATP 数量越多,提供能量越多,发光强度越大,即发光强度与 ATP 含量成正比;每个细菌细胞中 ATP 含量大致相同且相对稳定,故可以根据 ATP 含量进而测算出细菌数量。A 、 ATP 是细胞的直接能源物质, “ 荧光素一荧光素酶生物...
地下黑作坊用病死猪肉腌制的腊肉往往含有大量的细菌,可利用“荧光素--荧光素酶生物发光法”对市场中腊肉含细菌多少进行检测:①将腊肉研磨后离心处理,取一定量上清液放入分光光度计(测定发光强度的仪器)反应室内,加入适量的荧光素和荧光素酶,在适宜条件下进行反应;②记录发光强度并计算ATP含量;③测算出细菌数量.分析并...
1. 准备荧光素酶底物:根据实验需要选择合适的荧光素底物,常见的有荧光素、二甲基荧光素等。 2. 调配荧光素酶反应缓冲液:根据实验要求配制荧光素酶反应缓冲液,确保适宜的pH值和离子浓度。 3. 样品处理:根据实验目的,对待测样品进行处理,如提取靶标蛋白、纯化荧光素酶等。 四、检测流程 1. 预处理样品:将待测样...
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的实验。荧光素底物会在荧光素酶作用下会发光(波长540-600nm),且光强能反应荧光素酶的表达量。荧光素酶的蛋白表达量与启动子活性、mRNA的稳定性及翻译效率相关。从而将待测启动子、UTR等序列与荧光素酶ORF框融合表达,再...
活体成像技术(optical in vivo imaging)目前主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术,生物发光法是基于荧光素酶能催化底物(D-Luciferin或Coelenterazine)化学发光的原理,将体外能稳定表达荧光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射入体内的底物发生反应,利用光学系统检测光强度,间接反映出细胞数量的变化...
荧光素酶检测方法是一种敏感、快速且非毒性的检测方法,被广泛用于生物学、生化学和医学研究。本文将介绍荧光素酶检测方法的基本步骤。 二、实验材料准备 1. 荧光素酶:可购买纯度高的荧光素酶或使用自行表达和纯化的荧光素酶。 2. 荧光素底物:选择适合的荧光素底物,如D-luciferin。 3. 细胞或组织样品:根据实验...
腌制的腊肉往往含有大量的细菌,可利用“荧光素一荧光素酶生物发光法”对市场上腊肉中的细菌含量进行检测:①将腊肉研磨后离心处理,取一定量上清液放入分光光度计(测定发光强度的仪器)反应室内,加入适量的荧光素和荧光素酶,在适宜条件下进行反应;②记录发光强度并计算ATP含量;③测算出细菌数量。分析并回答下列问题: (1...