荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence),可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光,常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。 萤火虫萤光素酶 zui通用和zui常见的报告基因是北美萤火虫photinus pyralis的荧光素酶,该蛋白质不需...
可利用“荧光素—荧光素酶生物发光法”测定生物组织中ATP的含量,主要过程如下:①将所测生物组织研磨后沸水浴10分钟,然后冷却至室温;②离心处理后,取一定量的上清液放入分光光度计(测定发光强度的仪器)反应室内,并加入适量的荧光素和荧光素酶,在适宜条件下进行反应;③记录发光强度并计算ATP含量。下列说法错误的是( ...
测定生物组织中ATP的含量,常常用“荧光素—荧光素酶生物发光法〞。该方法的主要步骤如下:①将所测生物组织研磨后沸水浴10分钟,然后冷却至室温;②离心处理后取一定量的上清液
某研究性学习小组利用“荧光素——荧光素酶”生物发光法,测定人参愈伤组织中ATP的含量,以研究人参细胞能量代谢的特点。 实验原理:荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下,进行反应发出荧光;用分光光度计可测定发光强度;当荧光素和荧光素酶都足量时,在一定范围内,ATP的含量与发光强度成正比。 实验步骤: 步骤一:ATP的...
测定生物组织中ATP的含量,常常利用“荧光素—荧光素酶生物发光法”。该方法的主要步骤如下:①将所测生物组织研磨后沸水浴10分钟,然后冷却至室温;②离心处理后取一定量的上清液放人分光光度计(测定发光强度的仪器)反应室内,并加人适量的荧光素和荧光素酶,在适宜条件下进行反应,③记录发光强度并计算ATp含量。分析上述...
食品卫生检验人员常利用荧光素-荧光素酶生物发光法,测定食物样品中细菌的ATP总含量,从而判断食品污染程度.实验原理:荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下,进行反应发出荧光;用分光光度计可测定发光强度;ATP的含量与发光强度成正比.实验步骤:一、ATP的提取:称取一定量的食物样品,研磨后沸水浴10 min,冷却至室温,离心,...
荧光素酶-荧光素法测定ATP荧光素酶-荧光素法测定ATP: 取肝组织0.1~0.15g,加入1mL腺苷酸提取液中,匀浆后沸水中加热3min,然后以4000rcf/min离心3min,取上清液0.4mL,检测时将肝匀浆液0.1mL加入重蒸水0.1mL稀释,置入2mL的比色杯中,放入FG-200型发光光度计的暗室中,从暗室盖的小孔中快速注入荧光素酶系缓冲液0.8...
荧光素能在荧光素酶的催化下消耗ATP ,并与氧气发生反应,反应中产生激发态的氧化荧光素,当氧化荧光素从激发态回到基态时释放出光子。反应中释放的能量几乎全部以光的形式释放,只有极少部分以热的形式释放。 [详解]A、酶的化学本质是蛋白质,能显著降低化学反应的活化能,A正确;...
1.一种测定萤火虫荧光素酶活性的方法,其特征在于,包括如下s: 2.根据权利要求1所述的测定萤火虫荧光素酶活性的方法,其特征在于,所述s1中,化学发光反应体系包括腺苷三磷酸(atp)、底物荧光素luciferin、萤火虫荧光素酶、去离子水和反应缓冲液。 3.根据权利要求2所述的测定萤火虫荧光素酶活性的方法,其特征在于,所述反...