做完转录组分析之后,一般都要求做qRT-PCR来验证二代测序得到的转录本表达是否可靠。荧光定量PCR是一种相对表达定量的方法,他的计算方法有很多,常用的相对定量数据分析方法有双标曲线法,ΔCt法,2^-ΔΔCt法(Li…
384孔荧光定量的普及,使得批量检测基因变得更加便捷、高效,极大地提升了实验效率。传统手动加样需保持精神高度集中,初学者往往因为移液操作不熟练导致加样不均,加样错孔更导致实验失败,种种弊端制约了荧光检测的效率。在当前实验室条件下,通过采用专用的设备耗材,进行合理的排版和运算,即可实现批量操作,下文给出具体方案。
qRT-PCR 计算公式2–ΔΔCT (Livak) 方法 当我们做到荧光定量实验时候,普遍采用操作简便的2–ΔΔCT 法。 前提条件: 1. 使用2–ΔΔCT 法之前,必须验证目标基因和参照基因的扩增效率。目标基因和参照基因扩增效率都接近100%, 且相互间效率偏差在5% 以内。 计算方法: 首先,对所有的测试样和校准样本,用内参基...
请问这个是反转录后的单链cDNA吗?还是已经合成了第二链? 2022-12-18 10:302回复 睦科生物是单链的哈 2022-12-19 14:30回复 伊拉格其回复@睦科生物 :昂昂 好的 谢谢 2022-12-19 15:16回复 bili_34969462804 请问为什么需要内参呢? 2023-04-14 17:532回复 晚睡不起人没了没有内参怎么定量,你总要有...
我们专业从事动物建模、病理学、分子生物学等实验外包服务和科研编辑业务,想要进群或单独交流可以添加up微信:iScholar_01 2022-11-16 14:5210回复 镇音 3:00那里的1000L是认真的吗? 2022-09-15 16:1310回复 睦科生物感谢指出!是1000μL! 2022-09-16 08:493回复 Lil-zf 请问up主第一步加完trizol直接离心...
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