实时荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)是一种用于实时监测PCR反应进度的技术。同时,可以定量相对少量的PCR产物(DNA、cDNA 或 RNA)。qPCR基于对报告分子产生的荧光的检测,随着反应的进行,报告分子产生的荧光会增加。qPCR也称为Real-Time PCR,但需要注意的是,Real-Time PCR不应该被缩写成RT-PCR,RT-PCR指代...
1. PCR原理 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种在体外模拟DNA复制过程的技术。通过设...
01荧光定量PCR的原理 荧光染料和探针 荧光染料 荧光染料是一种能够吸收特定波长的光并发出另一波长光的物质,常用于标记DNA或RNA。染料的选择和优化对于提高荧光定量PCR的灵敏度和特异性至关重要。探针 探针是设计用来与目标DNA或RNA序列特异性结合的荧光标记的寡核苷酸序列。探针的长度、结构和标记的荧光染料类型都会...
荧光定量PCR利用荧光信号与PCR产物数量呈正比的原理,通过实时监测PCR反应过程中荧光信号的强度变化来确定反应体系中模板DNA的初始量。在PCR反应中,荧光探针与特定的DNA序列结合,并发出荧光信号。随着PCR反应的进行,产物数量逐渐增加,荧光信号也随之增加。通过检测荧光信号的增长曲线,可以确定初始模板DNA的数量。 二、应用 ...
一、原理概述 1.Real-TimePCR概论 实时荧光定量PCR技术于1996年由美国AppliedBiosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。实时荧光定量PCR:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时...
荧光定量PCR具有准确性高、灵敏度高、特异性强等优点,目前已广泛应用于分子生物学研究和医学研究等领域。荧光定量PCR原理 在PCR反应体系中加入荧光基团,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环收集一个荧光强度信号,通过荧光强度变化检测产物量的变化,末了得到一条荧光...
荧光定量PCR是一种高灵敏度、高特异性的分子生物学技术,可以用于定量检测目标DNA序列。其原理基于PCR反应和荧光信号的检测,通过测量PCR反应中荧光信号的强度来确定目标序列的初始模板DNA量。荧光定量PCR在基因表达分析、病原体检测、遗传疾病诊断、环境微生物分析等领域有广泛的应用,为分子生物学研究和临床实践提供了重要...
荧光定量PCR分析仪的原理基于荧光信号和荧光探针技术。在PCR反应中,荧光探针嵌入了PCR扩增产物的DNA序列中,一旦探针与靶标序列结合,就会释放荧光信号。荧光定量PCR分析仪会通过荧光信号的强弱来定量测定PCR扩增产物的数量。荧光定量PCR分析仪广泛应用于医学、生物学、环境等领域,以下是其主要应用:1、基因表达研究 荧光...