实时荧光定量PCR技术是在传统PCR反应的基础上发展而来的一种PCR变体。其原理可以简单概括为光信号的实时检测和荧光强度的定量分析。 实时荧光定量PCR技术的具体步骤如下: 1.引物与探针设计 在实时荧光定量PCR反应中,合适的引物和探针设计是至关重要的。引物用于在反应中特异性地扩增目标DNA或RNA序列,而探针则用于荧光...
通过在PCR 反应体系中加入荧光基团，在整个PCR 过程中实时检测产物中荧光信号强度来达到定量的目的。此项技术具有定量准确、特异性强、灵敏度高、操作简便等优点，越来越受到人们的关注和广泛应用。对实时荧光定量PCR 技术原理、分类和应用进行了阐述。关键词：实时荧光定量PCR ；原理；分类；应用 ...
它是一种在PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR 进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了对DNA 模板的定量,而且具有灵敏度高、特异性和可靠性更强、能实现多重反应、自动化程度高、无污染性、具实时性和准确性等特点,目前已广泛 应用于分子生物学研究和医学研究...
实时荧光定量PCR 技术的原理及其应用研究进展 自从1983 年 Mullis 发明聚合酶链式反应(polymerase chain reaction , PCR)以来,PCR 技术很快成为科研、临床诊断的热点技术.但是传统PCR 技术在应用中一是不能准确定量,二是容易交叉污染,产生假阳性. 作者: 赵焕英 包金风 作者单位: 首都医科大学北京神经科学研究所,北京...
实时荧光定量PCR荧光标记探针DNA结合染料篇首: 自从 1983 年 Mullis 发明聚合酶链式反应(polymerase chain reaction , PCR)以来,PCR 技术很快成为科研,临床诊断的热点技术.但是传统PCR 技术在应用中一是不能准确定量,二是容易交叉污染,产生假阳性.doi:10.3870/j.issn.1004-1850.2007.04.023赵焕英包金风中国组织化学与...
86e等首次提出了采用动态方法和封闭式检测方式对目的核酸数量进行定量分析荧光探针技术是基于标记基团的jk3原理而实现的当某个荧光基团的发射谱与另一个荧光基团的吸收光谱重叠且两个基团距离足够近时能量可以从短波长高能量的荧光基团传递到长波长低能量的荧光基团相当于短波长荧光基团释放的荧光被屏蔽这个过程称为jk3 ...
FRET )技术用于PCR 定量后,上述问题才得到较好的解决[1]。实时荧光定量PCR (rea-l ti m e fl u oro -geneti c quantitative PCR ,FQ-PCR)是在PCR 定性技术基础上发展起来的核酸定量技术。它是一种在PC R 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PC R 进程,最后通过标准曲线对 未知模板进行...
第16卷第 4期2007年 8月 中国组织化学与细胞化学杂志CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEM ISTRY AND CYTOCHEM ISTRY Vol 16 No.Aug .42007 实时荧光定量 PCR 技术的原理及其应用研究进展赵焕英 包金风*(首都医科大学北京神经科学研究所, 北京市神经再生修复重点实验室, 教育部神经变性病 重点实验室, 北京 100069) 关...