使用苯酚硫酸法测定多糖，就是使用比色法来进行的。1.使用比色法检测，就先要制作标准曲线。也就是称取标准的葡聚糖（如果用葡萄糖，需要考虑校正系数0.9），分别稀释8个梯度浓度，以0为空白，蒸馏水补充。然后加入6%的苯酚和硫酸溶液，摇匀静置30分钟，要在分光光度计的490nm波长下，测定每个点的吸光度，可以...
苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物.再以比色法测定. [操作] 1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml...
精确吸取葡萄糖标准液0、1、2、3、4、5、6mL,分别置于10 mL容量瓶中,以蒸馏水补至10 mL摇匀,依次吸取2ml加入试管中,加入苯酚液1.0 mL和浓硫酸5.0 mL,混匀,在室温放置30min后,于波长490 nm处测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标,葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线。 (10*10-2mg.ml*1/10=10*10-3mg.ml...
硫酸苯酚法测多糖是一种常用的多糖测定方法,其原理基于多糖与硫酸苯酚反应产生显色化合物的特性。 在测定中,首先将待测样品中的多糖加入到试管中。然后,向试管中逐渐加入浓硫酸,并快速而彻底地混合。硫酸的加入会引发多糖与硫酸之间的酸水解反应,生成大量的醛基。 随后,加入苯酚试剂,苯酚与醛基反应生成的有色化合物...
🌡️原理:利用苯酚硫酸法测定多糖含量,是通过糖类化合物在浓硫酸的脱水作用下,与苯酚缩合形成橙红色化合物,该化合物在490nm波长处有最大吸收峰。橙红色的深浅与糖含量成正比,从而可以定量测定多糖的含量。📊绘制标准曲线:首先,精确称取无水葡萄糖10mg,配置成0.1mg/mL的葡萄糖标准液。然后,通过移液枪吸取不同...
. 一、硫酸苯酚法测多糖含量 1、试剂配制 1.浓硫酸:分析纯,95.5% 2.5%苯酚:取苯酚5g,置100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀后,置棕色试剂瓶中,冰箱中冷藏储存备用。 3.标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia)或分析纯葡萄糖。准确称取20mg 经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中,蒸馏水溶解定容。 2...
🔬首先,你需要知道的是,苯酚硫酸法是基于多糖与苯酚在硫酸存在下发生显色反应的原理。这个反应会产生一种有色物质,其吸光度可以通过分光光度计来测量。📐计算公式如下: 多糖含量(mg/ml)= [(吸光度 / 标准曲线斜率) × 标准曲线截距] / 样品体积(ml)📊标准曲线是通过测量已知浓度的多糖标准品与苯酚硫酸...
硫酸-苯酚法测多糖含量 1.目的要求 测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量,如1型。 2.方法原理 糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚缩合成橙黄色化合物,且颜色稳定,在波长490 nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度计测定...
一、硫酸苯酚法测多糖含量 1、试剂配制 1. 浓硫酸：分析纯，95.5% 2. 5%苯酚：取苯酚5 g ，置100 ml 容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后，置棕色试剂瓶中，冰箱中冷藏储存备用。3. 标准葡聚糖（Dextr a n,瑞典Pharm a cia ）或分析纯葡萄糖。准确称取20m ...