使用苯酚硫酸法测定多糖,就是使用比色法来进行的。1.使用比色法检测,就先要制作标准曲线。也就是称取标准的葡聚糖(如果用葡萄糖,需要考虑校正系数0.9),分别稀释8个梯度浓度,以0为空白,蒸馏水补充。然后加入6%的苯酚和硫酸溶液,摇匀静置30分钟,要在分光光度计的490nm波长下,测定每个点的吸光度,可以...
准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)10mg于250ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8及0.9ml,各以蒸馏水补至1.0ml,然后加入5%苯酚1ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20min以后于490nm测光密度,以1.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。 1 2...
苯酚硫酸法测多糖含量一、硫酸苯酚法测多糖含量 1、试剂配制 1.浓硫酸:分析纯,% 2. 5%苯酚:取苯酚5 g,置100 ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀后,置棕色试剂瓶中,冰箱中冷藏储存备用; 3.标准葡聚糖Dextran,Pharmacia或分析纯葡萄糖;准确称取20m g经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中,蒸馏水...
🔬首先,你需要知道的是,苯酚硫酸法是基于多糖与苯酚在硫酸存在下发生显色反应的原理。这个反应会产生一种有色物质,其吸光度可以通过分光光度计来测量。📐计算公式如下: 多糖含量(mg/ml)= [(吸光度 / 标准曲线斜率) × 标准曲线截距] / 样品体积(ml)📊标准曲线是通过测量已知浓度的多糖标准品与苯酚硫酸反...
确定测定结果与真实结果的偏差除非高效液相测一下样品纯度(你不是有标样吗)很麻烦,得摸条件 这个实验意义不大,一般每个实验室都有自己加量而且固定,一般硫酸是苯酚5倍,苯酚6%和样品1:1或1:2,不用水浴,硫酸溶解会释放大量的热,多糖测定使世界难题,如果确定是什么多糖可以用酶法,别的还是水提醇沉,溶解,苯酚硫酸...
一、硫酸苯酚法测多糖含量 1、试剂配制 1.浓硫酸:分析纯,95.5% 2.5%苯酚:取苯酚5g,置100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀后,置棕色 试剂瓶中,冰箱中冷藏储存备用。 3.标准葡聚糖(Dextran,瑞典Pharmacia)或分析纯葡萄糖。准确称取20mg ...
苯酚硫酸法测多糖含量、硫酸苯酚法测多糖含量 1、试剂配制 1.浓硫酸:分析纯,95.5% 2.5%苯酚:取苯酚5g,置100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀后,置棕色 试剂瓶中,冰箱中冷藏储存备用。 3.标准葡聚糖(Dextran,Pharmacia)或分析纯葡萄糖。准确称取20m g经105°C 干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中,蒸馏...
硫酸-苯酚法测多糖含量 1.目的要求 测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量,如1型。 2.方法原理 糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚缩合成橙黄色化合物,且颜色稳定,在波长490 nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度计测定...
🌡️原理:利用苯酚硫酸法测定多糖含量,是通过糖类化合物在浓硫酸的脱水作用下,与苯酚缩合形成橙红色化合物,该化合物在490nm波长处有最大吸收峰。橙红色的深浅与糖含量成正比,从而可以定量测定多糖的含量。📊绘制标准曲线:首先,精确称取无水葡萄糖10mg,配置成0.1mg/mL的葡萄糖标准液。然后,通过移液枪吸取不同...