单细胞 RNA-seq 为我们了解组织的组成等提供非常好的工具,而单细胞测序的效果也取决于我们到底测多少细胞,一般而言几百个细胞的单细胞测序不仅仅捕获常见的细胞成分,也会捕获稀少类型的细胞。由于 RNA 降解,细胞的凋亡和实验误差等原因,一些数据将会被排除,不纳入数据分析环节,因此初始选择的细胞个数往往会大于我们目...
2017年发表在Nature Methods杂志上的SCENIC[1]算法,利用单细胞RNA-seq数据,同时进行基因调控网络重建和细胞状态鉴定,应用于肿瘤和小鼠大脑单细胞图谱数据,提出并证明了顺式调控网络分析能够用于指导转录因子和细胞状态的鉴定。SCENIC通过使用生物学驱动的features自动清除肿瘤样本特异性等批次效应。 基因调控网络 我们要深刻...
生信与基因组学:单细胞RNA测序(scRNA-seq)cellranger count的细胞定量和aggr整合 Seurat分析流程入门 1. 数据与R包准备 以下代码在RStudio中实现, Seurat 4.0。 1.1 PMBC数据下载 下载2700个10X单细胞-外周血单核细胞(PBMC)数据集。 # Seurat_1.R ### 1. 数据获取及读取 ### # 切换至工作目录 setwd("F...
RNA-Seq测序,又称RNA sequence测序,即转录组测序,简称RNA测序,就是用高通量测序技术进行测序分析,反映出mRNA,smallRNA,noncodingRNA等或者其中一些的表达水平。 什么是转录组? 转录组是某个物种或者特定细胞类型产生的所有转录本的集合。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定生物学过程以及疾病发生...
本次推送为大家献上一份ICELL8 cx单细胞分选系统用户可以参考的《单细胞长读长测序建库方案》。 基于ICELL8 cx系统的SMART-Seq应用工作流程,将和Oxford Nanopore Technology(ONT)一起奉献一场精彩的表演。 在该建库方案中,以单细胞起始,通过ICELL8 3'DE引物和5' SMART引物来合成cDNA及扩增。反转录酶首先以Oligo...
的文章，他们构建了一个跨越生理和病理状态的整个胃肠道（包括食管胃化生[E-GM]）、BE-IM、萎缩性胃炎和GIM的单细胞RNA-seq图谱，证明BE-IM和GIM共享分子特征，且单个细胞同时具有胃和肠上皮细胞的转录特性，在转录方面E-GM类似于萎缩性胃炎，此外，他们还证明GIM和BE-IM具有促肿瘤发生、活化的成纤维细胞微环境...
在来自MGH26和MGH30的另外167个细胞中对30个分类基因进行的单细胞qPCR证实了这些肿瘤内存在多个亚型,其比例与单细胞RNA-seq鉴定的比例相似。因此,虽然群体水平的数据可以检测到主导的转录程序,但它并没有捕捉到肿瘤内转录亚型的真正多样性。 瘤内亚型...
1. 单细胞RNA-seq概述 RNA-seq 允许以高效且经济高效的方式分析样本中的转录本。这是 00 年代末的一项重大突破,此后变得越来越流行,很大程度上取代了微阵列等其他转录组分析技术。其成功的部分原因在于 RNA-seq 允许对样本中的所有转录本进行无偏采样,而不是仅限于一组预先确定的转录本(如微阵列或 RT-qPCR)。
首先是导入数据,然后创建一个Seurat对象,接下来对数据进行质控(选择基因,细胞,标准化..),之后就要开始正式的分析了,先归一化,再PCA降维,然后就要开始聚类啦,那为什么要先降维再聚类呢,那是因为降维可以让数据降维到x轴和y轴上两个维度,这样也更方便聚类,因此RunPCA后就是FindNeighbors,参数如果选择dim为10,就是在...