5. 单细胞RNA-seq的数据挖掘 单细胞 RNA-seq 为我们了解组织的组成等提供非常好的工具,而单细胞测序的效果也取决于我们到底测多少细胞,一般而言几百个细胞的单细胞测序不仅仅捕获常见的细胞成分,也会捕获稀少类型的细胞。由于 RNA 降解,细胞的凋亡和实验误差等原因,一些数据将会被排除,不纳入数据分析环节,因此初始...
单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术已成为解开单个细胞内RNA转录物的异质性和复杂性,以及揭示高度组织化组织/器官/生物体内不同细胞类型和功能的组成的最先进方法。通过单细胞RNA测序,现在可以在一项研究中分析超过数百万个细胞的单细胞水平的转录组。这使我们能够在转录组水平上对每个细胞进行分类、表征和区分,从而识别出...
RNA-Seq测序,又称RNA sequence测序,即转录组测序,简称RNA测序,就是用高通量测序技术进行测序分析,反映出mRNA,smallRNA,noncodingRNA等或者其中一些的表达水平。 什么是转录组? 转录组是某个物种或者特定细胞类型产生的所有转录本的集合。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定生物学过程以及疾病发生...
Cell Ranger 是一组分析管道,用于处理 Chromium 单细胞数据以对齐 reads,生成特征条形码矩阵,执行聚类和其他二次分析等等。 它帮助我们生成 RNA reads 计数矩阵,我们将在学习中使用。注意:只有10x的数据才能用Cell ranger分析,除了10x数据还有其他获取单细胞RNA-seq测序的方式...
近几十年来,越来越多的研究使用RNA-seq数据探索了肺癌的潜在预后标志物,并提高了我们对肿瘤发生和进展的理解,但这些预后特征是基于RNA-seq数据,它无法检测肿瘤样本中确切的细胞和分子变化。单细胞RNA测序(scRNA-seq)能够在单细胞水...
对于每个基因,使用中位数回归估计整块和单细胞RNA-seq数据集在归一化前后的计数与测序深度关系。(a)左图显示了在一个大的RNA-seq数据集中对3个基因未归一化表达与对数测序深度估计回归,不包含零测量值,低、中、高表达定义分别为非零未归一化测量...
单细胞RNA测序,通常简称为scRNA-seq。这项技术使研究人员能够深入了解单个细胞的基因表达模式,揭示了生物体内的细胞异质性和功能多样性。
虽然scRNA-seq是一种功能强大且有见地的可以从单细胞水平分析基因表达的方法,但仍存在许多挑战和变异来源,这可能会使数据分析变得复杂或有限。 总体而言,我们建议关注以下内容: 除非对你所研究的实验问题非常有必要,否则不要做单细胞 RNA-seq。你可以使用更简单且成本更低的批量测序来解决这个问题。也许 FACS 可以对...
序列错误:PCR扩增或测序过程中可能会出现错误,并可能导致细胞计数不足或过多。 用于将 RNA-seq 读数解复用到细胞特异性 bin 中的计算工具使用各种诊断指标来过滤掉人工数据或低质量数据。 例如,存在多种去除环境 RNA 污染的方法 [Lun 等人,2019,Muskovic 和 Powell,2021,Young 和 Behjati,2020]、双峰检测 [Bais...