据报道,2008年Genzyme公司Allston工厂由于培养基被水疱症病毒污染,生产CereZyme和FabraZyme的CHO细胞受到了水疱症病毒(VesiVirus 2117)污染,该工厂花费了920万美金,用于关停6-8周进行原因调查和病毒清除,并支付了1.75亿美元的罚款[9],造成该年直接销售损失约1-3亿美元[10]。 然而,病毒污染不易清除和灭活,近年来,MMV...
特点:病毒污染的细胞液通常清亮无变化,大部分被污染的细胞也不会产生形态及病理现象,小部分病毒会造成细胞变圆、肿胀、脱落。 病毒污染可用血细胞吸附实验、免疫荧光抗体法以及电子显微镜法检测,但其清除是十分困难的,一旦不幸被污染,建议直接重新引入高质量细胞株。 微生物污染预防 微生物污染在细胞培养中是非常常见的...
细胞培养的污染物可分为两大类,化学污染物,如培养基、血清和水的杂质、内毒素、增塑剂和洗涤剂;以及生物污染物,如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体,以及其他细胞系的交叉污染。虽然不可能完全消除污染,但通过彻底了解其来源并遵循良好的无菌技术,就可以减少其发生的频率和严重性 生物污染的主要类型: 1.细菌污染 细菌...
病毒污染 采用组织细胞培养法生产疫苗,如果没有除去潜在病毒的组织培养物,会产生病毒污染。目前,从原代猴肾细胞的培养中已发现不少于20种血清性病毒。尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。若二倍体细胞系有SV40或多发瘤病毒,B淋巴细胞含EB病毒,细胞和会发生变异、转化,形成异倍体的细胞系。因此...
3. 细胞培养试剂 血清在生产时已被支原体或病毒污染,或存在化学污染; 试剂配置时,试剂质量不达标或玻璃器皿未严格消毒。 4. 细胞 交瘤细胞中需特别注意逆转录病毒污染; 供应的原种出现污染,细胞源头质控问题; 培养两种以上细胞时,操作不规范,可能导致细胞交叉污染。
1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。 2、支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一.而且它不能用过滤的办法除去.支原体...
制造商可以采取多种方法降低细菌或支原体引起的细胞培养污染风险。但是,病毒(特别是无包膜细小病毒)引起的污染风险,即使是在使用化学限定培养基(1)的情况下,对生物制药行业而言仍然是一个巨大的挑战。 传统的除菌级过滤器, 即使是0.1微米的过滤膜都不能防止无包膜微小病毒造成的污染。
在病毒学研究中,细胞实验室是进行病毒培养、复制和感染机制研究的重要场所。然而,微生物污染是这一过程中常见且严重的问题,它不仅影响实验结果的准确性,还可能对研究人员的健康构成威胁。因此,避免细胞实验室发生微生物污染在病毒学研究中显得尤为重要。 一、微生物污染对病毒学研究的影响 ...
病毒污染的检测:利用PCR、ELISA等方法检测细胞库中的病毒,如HIV、HBV、HCV等,确保细胞的安全性。 制备细胞样品的质量检测:这包括对细胞存活率、形态学特征、冻存液的冷冻解冻效果等指标的检测,以评估细胞样品的质量。 细胞株的功能验证:通过细胞增殖、分化、凋亡等功能实验,验证细胞株的功能性,确保其适用于相应的实...