随后,研究人员进一步使用共聚焦显微镜观察TSPO缺失细胞在焦亡过程中的动态变化。正常条件下,WT巨噬细胞和TSPO--KO细胞均未见GSDMD的表达;LPS+ATP处理后,TSPO-KO细胞比WT细胞表达了更多的GSDMD。为了进一步验证TSPO与GSDMD之间是否发生相互作用,研究人员用TSPO-GFP质粒转染到293T细胞系中,结果发现,在LPS + ATP处理后,TS...
由于细胞焦亡跟免疫炎症有关,因此在基础研究中,常用巨噬细胞作为焦亡诱导(LPS+ATP)的工具细胞模型。 想要做一篇好的焦亡研究,避免不了要做巨噬细胞的原代分离和焦亡诱导,所涉及的手段就会包括:流式多因子标记并分选原代巨噬细胞;流式双染及电镜查看细胞膜破裂情况;以及QPCR/WB/IF等手段对焦亡相关因子Caspase1、NLRP...
随后,研究人员进一步使用共聚焦显微镜观察TSPO缺失细胞在焦亡过程中的动态变化。正常条件下,WT巨噬细胞和TSPO--KO细胞均未见GSDMD的表达;LPS+ATP处理后,TSPO-KO细胞比WT细胞表达了更多的GSDMD。为了进一步验证TSPO与GSDMD之间是否发生相互作用,研究人员用TSPO-GFP质粒转染到293T细胞系中,结果发现,在LPS + ATP处理后,TS...
经典途径中,当PRR受到刺激时,procaspase-1被激活,炎症小体产生成熟的caspase-1。而在非经典途径中,caspase-11直接识别外源或内源刺激并被LPS(脂多糖,来源于革兰氏阴性菌)激活。激活的caspase-1/11可以将完整的GSDMD切割成GSDMD N端结构域(GSDMD-NT)和GSDMD C端结构域(GSDMD-CT)两部分,其中caspase-1能够诱导IL-...
有人对雷公藤红素抑制LPS与ATP诱导的细胞焦亡,可能与抑制IL-1β的分泌,抑制caspase-1的活化有密切关系 [51]。可见中药及其提取物可以提供与细胞焦亡机制相关的、治疗原发性肝癌候的选化合物,具有良好的开发前景。 开发以细胞焦亡为靶点的药物是原发性肝癌治疗的新策略,但目前相关的研究仍不够充分;此外,细胞焦亡的...
在非经典细胞焦亡途径中,LPS可以直接与Capase-4/5/11结合,一方面,活化的Caspase-4/5/11可以裂解GSDMD蛋白,GSDMD蛋白N端既可以介导细胞膜溶解与细胞焦亡,还可以激活NLRP3炎症小体来活化Caspase-1,最终产生IL-1β并外释;另一方面,活化的Caspase-4/5/11激活通道Pannexin-1,释放ATP以开放胞...
这些半胱氨酸蛋白酶的激活是通过LPS与相应的前半胱氨酸蛋白酶的直接结合发生的,并且绕过了炎症小体传感器。尽管这些半胱氨酸蛋白酶不直接激活IL-1β和IL-18,但它们通过GSDMD裂解触发细胞焦亡导致钾离子外流,从而激活NLRP3炎症小体并上调caspase-1的作用。
七、LPS通过非典型的炎性体途径诱导凝血。 革兰氏阴性细菌通过多种机制激活炎症小体。LPS通过依赖于炎症小体的TF释放触发凝血。因为LPS通过炎症小体激活引起凝结,所以我们假设GSDMD依赖性细胞焦亡也通过Gsdmd-/-小鼠驱动LPS诱导的非典型凝结和致死性。 GSDMD缺乏症对LPS诱导的血细胞减少症表现出适度但重要的保护作用(图...
2014年，邵峰研究组在Nature以长文（Article）的形式报道了Caspase-4/5/11可以直接识别结合胞内菌产生的LPS，而不需要其他胞内受体（如NLRP3等），该作用可直接活化Caspase-11不经过Caspase-1的作用直接发生焦亡【32】，完美解析了Dixt VM在11年、13年的工作。本文的核心发现颇为有趣，作者在制备体外纯化蛋白时...
LPS诱导细胞焦亡需要加ATP单核细胞渗出血管,进入组织和器官后,可进一步分化发育成巨噬细胞,成为机体内吞噬能力最强的细胞。 巨噬细胞在不同组织中的名称不同:在肺白族立状技里称“肺巨噬细胞”;在神经系统里称为“小神经胶质细胞”;在骨里则称为“破骨细胞”。 单核-巨噬细胞是对他。在ERDAS LPS下生成DEM和...