细胞凋亡(Apoptosis):也称细胞程序性死亡(Programmed Cell Death,PCD),是为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用,属于细胞的“自杀”行为。 细胞凋亡的典型特征: 1)线粒体膜电位的丧失; 2)细胞膜PS(磷脂酰丝氨酸)的外翻; 3)细胞核凝缩和断裂。
细胞凋亡时出现的DNA片段化会产生DNA链断裂,能够用TUNEL (末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) 分析。 APO-BrdU TUNEL分析是标记DNA断裂和细胞所有DNA的双染色分析,通过成像技术或流式细胞仪来检测凋亡细胞。 也可使用碘化丙啶 (PI) 来分...
凋亡DNA含量流式细胞术喜树碱(CAM)诱导人类急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)细胞怪高渗磷酸-柠檬酸盐缓冲液(PC)处理,并同时用线性放大和对数放大进行DNA含量分析.结果显示,在DAN直方图上,可将亚G1凋亡峰和坏死细胞碎片峰有效地分开,并且不影响G1期细胞与G2期细胞DNA含量间的线性关系.提示流式细胞术DAN含量分析...
细胞凋亡有别于细胞坏死,它有一系列的细胞形学和生物化学的改变,包括出现染色质浓缩、DNA降解、凋亡小体形成等。流式细胞术检测细胞凋亡(AnnexinV-FITC/PI双染法)一、原理 在正常的活细胞,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在凋亡的细胞,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露...
实验九流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期时相杭州师范大学刘姬艳第1页一、实验目旳1、理解流式细胞术(FCM,FlowCytometry) 旳基本原理。2、理解流式细胞术分析细胞凋亡旳检测办法。3、理解流式细胞术分析细胞群体DNA含量分布 旳基本办法。第2页二、实验原理●细胞凋亡(Apoptosis)是指细胞基因调控旳一种自主性旳自杀...
流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期时相 第2页 二、试验原理 ●细胞凋亡(Apoptosis)是指细胞基因调控一个自主性自杀现象。或者说在一定生理或病理条件下,细胞遵照本身程序,自我结束生命死亡方式。因为这种死亡方式是由基因调控死亡过程,所以又称之为程序性细胞死亡(ProgrammedCellDeath)。●细胞凋亡有别于细胞坏死(...
TdT介导的dUTP缺口末端标记法(TdTmediated-dUTP nick end labelling, TUNEL)是20世纪90年代发展起来的检测细胞凋亡的方法,可用于石蜡包埋组织切片和冰凉组织切片的免疫组织化学分析和单细胞悬液的流式细胞术分析。细胞凋亡时,核酸内切酶被活化...
分析方法概述荧光染色法:使用荧光标记的探针检测凋亡细胞,如AnnexinV/PI染色。 细胞色素c释放分析:通过检测细胞色素c的释放来评估凋亡的程度。 DNA断裂检测:利用TUNEL染色等技术检测DNA的断裂情况,反映细胞凋亡状态。 流式细胞术结合分析:结合流式细胞术进行高通量的细胞凋亡分析。 细胞周期分析:探究凋亡在细胞周期中的...
摘要: 从三方面探讨检测细胞凋亡流式细胞术的方法.选用大鼠皮质神经元细胞,同时使用碘化丙锭(PI)An-nexin V/PI.JC-1法检测细胞凋亡率.结果显示三种方法的凋亡率分别是:2.60%,6.52%和18.56%,两两之间有显著性差异(P<0.01).JC-1法敏感,AV/PI次之,PI单染法不适合检测早期细胞凋亡. ...
总之,凋亡细胞线粒体膜电位的流式细胞术分析是一种新型的技术,它可以利用流式细胞技术实时监测细胞凋亡过程中线粒体膜电位的变化及其与其他相关细胞因子的相关性。这种技术的发展不仅有助于揭示凋亡机制,也有助于精确治疗凋亡相关疾病。因此,以线粒体膜电位变化为标题的流式细胞术分析可能是一个非常有前景的研究方向...