一、zo-1的免疫荧光,步骤如下:1. 细胞在盖片上生长融合到95%-100%时,从孵箱中取出2. 用预温的1×PBS洗3次,每次10分钟3. 4%的甲醛室温固定20-30分钟4. 1×PBS洗3次,每次10分钟5. 0.2%Triton X-100透化2-5分钟6. 1×PBS洗3次,每次10分钟7. 5%BSA室温封闭30分钟8. 加一抗(用1%BSA稀释)放在...
细胞免疫荧光实验方法1.细胞制备1.从培养箱中取出细胞。在倒置光学显微镜下观察细胞形态。弃去培养基。2.加入预冷的PBS轻轻将细胞洗2次2.固定样本1、加入4%多聚甲醛常温固定10min。2、将多聚甲醛去除,加入预冷的PBS洗3次,每次5min。3、加入含0.25% Triton X-100的PBS,在...
如果涉及到双标染色，切记要将两种蛋白的抗体来源种属区分开，二抗的荧光素也要区分开；◆ 在洗涤过程中，一要注意动作轻柔，固定后的细胞比较脆弱，如果太过剧烈，很容易把细胞吹洗掉，二是洗涤时间要把握好，每次洗涤5min左右，三是切忌不要干片，防止背景过高；◆ 细胞免疫荧光最好不封片，新手很容易在最后一步...
三种细胞免疫荧光染色操作步骤(二)。三、细胞免疫荧光简单实验步骤如下: 1. 漂洗血清蛋白H7、2-7、4 37度 PBS 2小时。 2. -20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟。 3. PBS洗净:3min×3。 4. 1%Tr - 实验小鼠鼠于20240326发布在抖音,已经收获了1个喜欢,来抖音,记录
一、zo-1的免疫荧光,步骤如下:1. 细胞在盖片上生长融合到95%-100%时,从孵箱中取出2. 用预温的1×PBS洗3次,每次10分钟3. 4%的甲醛室温固定20-30分钟4. 1×PBS洗3次,每次10分钟5. 0.2%Triton X-100透化2-5分钟6. 1×PBS洗3次,每次10分钟7. 5%BSA室温封闭30分钟8. 加一抗(用1%BSA稀释)放在...
一、石蜡切片免疫荧光染色实验步骤 1.多聚甲醛固定组织脱水：75%酒精4h；85%酒精2h；90%酒精1.5h；95%酒精1h；无水乙醇Ⅰ0.5h；无水乙醇Ⅱ0.5h。2.组织透明：组织块经酒精脱水后必须经过透明。透明剂（无水乙醇：二甲苯（1：1）溶液侵泡10min；二甲苯Ⅰ侵泡10min；二甲苯Ⅱ侵泡7min；）能同时与脱水剂...
PBS 清洗样品。用新鲜配制的 2%(或 4%)多聚甲醛溶液在培养板中固定细胞 15minPBS 清洗样品。用新鲜配制的 2%(或 4%)多聚甲醛溶液在培养板中固定细胞 15min 防止细胞从玻片上脱落;多聚甲醛使得蛋白变性,停止细胞中的生化反应,使细胞维持状态;固定其中的各种生化物质状态,防止分解;固定细胞形态,防止其变形或破裂...
一、准备免疫荧光所需的仪器与试剂: CO2恒温培养箱、倒置荧光显微镜、离心机、超净工作台、DMEM培养基、胎牛血清、胰酶、抗生素 二、细胞免疫荧光技术操作 1.在培养板中将已爬好细胞的玻片用生理盐水浸洗3次; 2.用4%的多聚甲醛固定爬片15 min,生理盐水浸洗玻片3次; ...
p53蛋白在MCF-7、MDA-MB-231有表达,阳性染色为相应荧光素标记的绿色,胞核为DAPI标记的蓝色。 五、实验材料 1、主要仪器 2、主要试剂 六、实验原理 免疫荧光细胞是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体...
你知道不,这细胞免疫荧光直标染色就好比是给细胞化个美美的妆。咱得小心翼翼,一步一步来,可不能马虎哟! 首先呢,咱得准备好咱的“舞台”,也就是干净的载玻片,把细胞给乖乖地铺上去,让它们舒舒服服地躺着。 然后,就该给细胞来个“沐浴”啦,用合适的固定液,把它们固定住,可别让它们乱跑咯!这就像是给它们穿...