3.RNA逆转录成cDNA 根据RT q-PCR试剂盒进行RNA逆转录实验即可。 视频讲解了试剂盒每种试剂的用途。 注意: 逆转录引物需要Oligo+随机引物即可; 实验中所有枪头、离心管等转移工具必须是无酶的,否则可能会导致RNA降解! 4.cDNA跑q-PCR 步骤很简单: 安排96孔板的加样位置 配制反应体系(Sybr green mix 10uL;dd ...
首先你说的RT-PCR就是反转录PCR的意思,是RNA反转录为DNA其次为什么用RNA是因为：RNA是由DNA转录过来的,其过程中会出现去掉外显子等步骤.如果用DNA做模板那么很有可能在转化到工程菌里面的时候得不到,你需要的目的产物.最后,这其中还有包括很多知识,为什么用信使RNA不用转录之前的DNA就在于转入之前的DNA...
首先你说的RT-PCR就是反转录PCR的意思,是RNA反转录为DNA其次为什么用RNA是因为:RNA是由DNA转录过来的,其过程中会出现去掉外显子等步骤.如果用DNA做模板那么很有可能在转化到工程菌里面的时候得不到,你需要的目的产物.最后,这其中还有包括很多知识,为什么用信使RNA不用转录之前的DNA就在于转入之前的DNA一般不可能在...
Q-PCR 相对表达量，结果算出来不同组织间相差很大，想知道详细的计算方法？谢谢，望不吝赐教！[Last ...
③固定后标本巢式RT-PCR,除体积分数为0.1的甲醛固定48h后扩增结果不稳定外,其余各固定方式均能扩增出特异性带。对电泳结果进行灰度扫描时,与甲醛相比,甲醇、乙醇和丙酮固定的标本中扩增的产物电泳条带更亮,灰度值更高(P〈0.01)。结论:①对RNA完整性的保存沉淀脱水类固定剂明显优于醛类固定剂。②对RNA病毒感染...
应用RT-PCR方法检测30例胃腺癌mdr-1基因的表达.结果发现术前化疗的胃腺癌中mdr-1表达阳性率为91%,明显于高前非化疗组的阳性率.在术前非化疗组中,中分胃癌的阳性率高于低分化胃癌的阳性率.mdr-1基因的表达与胃癌转移的发生率无明确关系,临床检测胃癌mdr-1基因的表达,有助于选择术化疗方案.关键...
酶链反应(PCR) 在PCR反应中,杰瑞安数显旋涡混合器主要用于反应体系的混合和均一化。在PCR反应开始前,需要将引物、模板DNA、酶和其他反应组分精确混合在一起。使用旋涡混合器可以迅速且均匀地混合这些组分,确保每个反应管中的反应条件一致,从而提高PCR反应的效率和准确性。此外,在PCR反应后的产物分析中,旋涡混合器也...
目的探讨低度恶性纤维黏液样肉瘤(low-grade fibromyxoid sarcoma,LGFMS)福尔马林固定石蜡包埋组织(formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE)中用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测FUS-CREB3...
已距硫分析;2.冰冻切片可以不做脑组织固定;3.不可用于westernblot愿战卷李尼至路和PCR;4.如果观察脑组织的缺血、损伤或其它病变时,不作;原理:;心脏灌流术能够快速冲书净血液并在动物死亡前进行组织;必要性:;1.脑组织较软,且细胞成分不易保留,脑组织是较易;2.经前固定后,取脑操作时,可减少脑组织损伤;3...
2. 2.冰冻切片可以不做脑组织固定。 3. 3.不可用于western blot和PCR。 4. 4.如果观察脑组织的缺...