通过泛素化线粒体外膜蛋白来启动自噬；而非泛素依赖途径则是由线粒体自噬受体如NIX、BNIP3和FUNDC1等...
线粒体自噬的检测方法主要有以下几种: 1.透射电镜技术(TEM):这是研究自噬发生的最直接、最可靠的手段。透射电镜可以观察到线粒体自噬体和线粒体自噬溶酶体的形成和结构特征,从而判断自噬是否发生。 2.荧光显微镜技术:通过荧光标记的方法,可以观察线粒体自噬的动态过程,例如使用荧光探针标记技术对线粒体和自噬体进行...
1) 通过电子显微镜或荧光显微镜直接观察线粒体自噬体的结构或线粒体自噬的动态过程; 2) 通过流式细胞术检测线粒体膜电位、线粒体总量及免疫印迹技术检测线粒体自噬相关蛋白表达量的变化等方法间接反映线粒体自噬活性; 3) 通过人为对线粒体自噬通路进行实验性调节来全面评...
因此我们需要使用一些化合物来刺激样本,促进线粒体自噬的发生,进而检测相关蛋白。以PINK1和BNIP3为例: 1)PINK1 PINK1由581aa组成,分子量约为63kDa。前面也讲到在稳态条件下线粒体上的PINK1会被切割水解,根据切割位点不同,会产生~52kDa或~48kDa截短形式。因此在正常生理条件下,PINK1全长形式存在较少。#热点#国...
自噬的检测方法 透射电镜法 自噬体属于亚细胞结构,普通光镜下看不到,直接在透射电镜下观察自噬不同阶段的形态变化。 隔离膜的产生发生在自噬初期,自噬小体的产生发生在自噬中期,自噬溶酶体发生在自噬后期。 荧光法 自噬发生时,细胞内产生大量的自噬体,内源性LC3...
（4）核糖体 排出细胞外或细胞内利用 增强 这道试题以线粒体与细胞“自噬作用”为素材考查细胞...
在研究线粒体自噬的过程中，如Myoferlin与线粒体自噬的影响，通过WJ460处理PDAC细胞，观察线粒体形态、自噬体与线粒体的共定位，以及检测线粒体ROS丰度等方法，可以揭示线粒体自噬在特定细胞系中的作用机制。综上所述，线粒体自噬是一个复杂且关键的过程，其机制与检测方法对理解细胞生理与病理具有重要...
检测线粒体自噬的方法多样，包括观察线粒体形态变化、测定线粒体ROS浓度、免疫定位自噬体和线粒体、使用线粒体自噬追踪探针以及Western blot检测相关标志物。其中，线粒体形态观察、ROS浓度测定以及线粒体自噬相关探针的使用，是常用的检测方法。例如，线粒体SCF-FBXL4泛素E3连接酶复合体可以降低BNIP3和...
检测线粒体自噬相关蛋白的方法通常需要通过化学诱导促进自噬发生，然后利用免疫印迹、免疫荧光或流式细胞术等技术手段对相关蛋白进行定量分析。以BNIP3为例，BNIP3L/NIX与BNIP3在低氧条件下被激活，形成同源二聚体锚定在线粒体外膜上，促进线粒体自噬。模拟低氧条件的化合物，如Cobalt Chloride，可以实现...
1、本发明旨在提供一种细胞线粒体自噬的检测方法及其应用,改善现有技术中存在的定量分析中存在不足、只能识别部分线粒体自噬阶段而不能检测到线粒体自噬全过程等问题。 2、本发明提供一种细胞线粒体自噬的检测方法,包括以下步骤: 3、s 1、将腺病毒感染后的细胞使用线粒体荧光探针进行标记;所述腺病毒包括mrfp-gfp...