索拉非尼耐药性肝细胞癌自噬目的构建耐索拉非尼肝癌细胞株并探讨其耐药机制.方法应用HepG2,Huh7细胞通过浓度递增法建立耐索拉非尼细胞模型.通过CCK8法检测细胞对不同浓度索拉非尼的敏感性.通过划痕实验检测细胞的迁移能力.通过流式细胞术分析细胞凋亡情况.通过荧光实时定量RT-PCR和Western blot实验检测凋亡相关因子caspa...
尼浓度不低于10μM/L时,传代培养50～70天,分离786‑O细胞,即得所述肾癌索拉非尼耐药细胞株;该构建方法利用不同浓度的索拉非尼处理人肾癌细胞株786‑O细胞,逐步增加药物浓度法建立肾癌索拉非尼耐药细胞系,并以此浓度作为筛选浓度继续长期刺激细胞一段时间,最终获得肾癌索拉非尼耐药细胞株,索拉非尼耐受浓度达到10...