答:测定: 基本原则:将米氏方程变化成相当于 y=ax+b 的直线方程,再用作图法求出 Km。 意义: ①当 v=Vmax/2 时, Km=[s](Km 的单位为浓度单位 )。②是酶在一定条件下的特征物 理常数,通过测定 Km 的数值,可鉴别酶。③可近似表示酶和底物亲和力, Km 愈小, E 对 S的亲和力愈大; Km 愈大, E对 ...
1. 该方法的依据是米氏方程。2. 米氏常数测定是酶促动力学实验中的重要参数之一,而双倒数作图法是测定米氏常数的一种常用方法。3. 双倒数作图法的依据主要基于米氏方程。4. 米氏方程是描述酶促反应速度与底物浓度之间关系的方程,其形式为v=Vmax[S]/(Km+[S]),其中v是酶促反应速度,Vmax是最...
米氏常数(Km)是酶的特征性常数,表示酶与底物结合的亲和力。在一定的实验条件下,酶促反应的初速度(v)与底物浓度([S])之间的关系可用米氏方程表示: \[ v = \frac{V_{max} [S]}{Km + [S]} \] 当底物浓度很低时,酶促反应速度与底物浓度成正比,随着底物浓度的增加,反应速度逐渐加快,但增速逐渐减慢。当...
实验结果显示,米氏常数的数值约为3.0 x 10^8 m/s,这与已知的数值非常接近。 结论: 通过本实验,我们成功地测定了光在不同介质中的传播速度,并确定了米氏常数的数值。实验结果表明,光在不同介质中的传播速度存在差异,这是由于介质对光的传播具有阻碍作用。同时,实验结果也验证了米氏常数的准确性和可靠性。这些...
米氏常数测定时的要求有要在沸水浴1min终止反应而后再加入NAOH。米氏常数是研究酶促反应动力学最重要的常数。它的意义如下:它的数值等于酶促反应达到其最大速度Vm一半时的底物浓度〔S〕。它可以表示酶和底物之间的亲和能力,Km值越大,亲和能力越弱,反之亦然。米氏常数可以确定一条代谢途径中的限速步骤...
公式中V是酶促反应速率,[S]是底物浓度,Vmax 是最大反应速率,Km为米氏常数。米氏方程可是小编母校研究生面试必考题目,不能忘记! Lineweaver-Burk 双倒数法: 自然界中酶有千万种,但并非所有的酶都遵循米氏方程,为了验证酶是否遵循米氏方程,我们可以实验测定在同一酶浓度条件下,...
在测定米氏常数时,以下几个方面尤为关键:1.严格控制反应时间:反应时间的控制是关键,加入NaOH终止反应的时间过长,应在之前沸水浴1min终止反应而后再加入NaOH。这是因为反应时间过长可能导致酶活性降低,影响测定结果。2.反应温度:保持反应温度恒定,以消除温度对酶活性的影响。酶活性受温度影响较大,不...
底物浓度对酶促反应速度的影响 ——米氏常数的测定 目的要求 (1)了解底物浓度对酶促反应的影响 (2)掌握测定米氏常数Km的原理和方法 Km定义: 实验原理 Km值等于酶促反应速度达到最大反应速度一半时 所对应的底物浓度。 Km的意义 双倒数作图法测定Km值: 1M NaOH滴定至微弱而持续的微红色。 1米M氏标方准程N中...
米氏常数的测定 ⽶⽒常数的测定 底物浓度对酶促反应速度的影响 ——⽶⽒常数的测定 ⼀.⽬的要求 1.1了解底物浓度对酶促反应的影响。 1.2掌握测定⽶⽒常数K m 的原理和⽅法。⼆.实验原理 酶促反应速度与底物浓度的关系可⽤⽶⽒⽅程来表⽰:式中:v ——反应初速度(微摩尔浓度...