瞬时转染法是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中，重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体，可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞，并对溶解产物中目的基因的表达进行检测 。第一，操作简易和周期短。传统的稳定转化系统，从转化到获得转基因植株至少...
图2. 稳定转染方式 操作过程对比瞬时转染与稳定转染在实验步骤上既有相似之处，也存在显著差异，尤其是在实验周期和操作复杂度方面。以下是这两种技术的流程对比（见图3、图4）：图3. 瞬时转染流程图 图4. 稳定转染流程图相似之处01细胞准备：都需要选择适当的细胞系，并将其培养至对数生长期，以确保细胞处于最...
Gibco FreeStyle MAX 转染试剂是一种新型转染试剂,用于转染 FreeStyle CHO 和 HEK-293 细胞,具有更高的转染效率,可快速生产每升达到毫克规模的蛋白。 订购FreeStyle MAX 试剂 赛默飞世尔科技是瞬时转染材料的可靠供应商,我们提供的材料包括细胞培养基、载体、质粒纯化产品和转染试剂。根据样品类型了解转染试剂...
本文借助设计实验（DoE）方法，快速分析了瞬时转染CHO细胞表达系统中多项工艺参数对蛋白表达的影响，并开发了一种简便、稳健的工艺，适合高通量表达及Wave生物反应器的放大生产[1]。实验方法 通过Box-Behnken实验设计（图1），研究了DNA浓度、PEI:DNA比例及细胞密度对转染效率的影响。研究同时考察了两种转染方式：1）预...
细胞转染作为生命科学领域的一项关键技术,其原理在于,在一定条件下,细胞能够主动或被动地导入外源基因(DNA、RNA)等遗传物质,从而获得新的表型特性。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染两大类。 本期细胞学堂将对这两种转染方式的原理、操作及转染方法进行全面的比较分析,帮助您轻松选择适合的转染技术,顺利开展实验。
瞬时转染 ‹转染方法 瞬时转染 稳定转染 共转染 电穿孔 在瞬时转染中,导入的核酸在细胞中存在的时间有限,且未整合到基因组中。因此,在细胞分裂过程中,瞬时转染的遗传物质不会传递至下一代,而是在环境因素影响下丢失或在细胞分裂过程中被稀释。但是,当所转染的遗传物质在细胞中保持高拷贝数期间会引...
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,只在自由载体上存在,不会整合到细胞染色体上。这种转染方式的基因表达时间通常较短,一般在96小时内。瞬时转染主要用于短期的基因表达研究,例如药物筛选或蛋白质功能分析。 稳定转染 🌱 稳定转染则是指将外源DNA整合到宿主细胞的染色体中,使宿主细胞长时间表达靶基因。这种转染方式需...
细胞转染（Transfection）是一种关键技术，它允许我们将外源性核酸，例如DNA或RNA，引入到细胞内部。通过这种方式，我们可以操控细胞内特定基因的表达或沉默，进而深入研究这些基因的功能及其调控机制。细胞转染实验通常可分为两大类：瞬时转染和稳定转染。在瞬时转染中，外源DNA或RNA被引入细胞，并在短时间内，通常是几天...
CHO 瞬时表达系统具有时间短、通量高、操作简单、可放大等优势,从首次被报道到应用在生物反应器中,CHO 瞬时表达系统已经通过改进细胞系、表达载体、转染试剂和培养基等实验参数取得了相当大的进展。 在进行试验确定了一系列参数后,如何将CHO 瞬时表达系统进行工艺放大成为一个关键节点。无论细胞系和转染方法如何,瞬转...