可形成稳定并且不被蛋白质或其他两性电解质改变的连续pH梯度;②各组分的导电能力接近,使电泳介质中电位降分布均匀,高电压缩短电泳时间,提高分辨率时,避免局部过热而影响pH梯度的稳定,甚至烧坏凝胶;③分子量小,便于与分离后的蛋白质用透析或分子筛技术分离;④化学组成不同于被分离物质,在280nm处吸光度低,不干扰样品...
等电聚焦(isoelectric focusing,IEF)是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位,因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。 ⒈IEF的基本原理 在IEF的电泳中,具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极,pH值逐渐增大。如前所述,蛋白质分子具...
第七章、等电聚焦电泳技术 第六章、第六章、等电聚焦电泳技术 等电聚焦（等电聚焦（isoelectrofocusing,IEForEF)：：等电点聚焦就是在电场中形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯到阴极逐步增加的梯度，不同的蛋白质移动并聚焦于与其等电点相当的pH位置上位置上，当的位置上，从而达到蛋白质的分离目的。到蛋白质...
⒈IEF的基本原理在IEF的电泳中,具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极,pH值逐渐增大。如前所述,蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征,这样在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动,直至某一pH位点时失去电荷而停止移动,此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点(pl)。同理,位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向...
1)上槽中加入阴极电泳液(20mM氢氧化钠:须由1M储存液新鲜配置); 2)下槽中加入阳极电泳液(10mM磷酸:须由1M储存液新鲜配置)。 等电聚焦电泳条件: 1)接好电极; 2)恒压150V电泳30min; 3)恒压200V电泳2.5h,开始时候控制电流为10mA左右,在聚焦过程中电流有所下降,电泳内室温度在电泳的过程中将升至40-50摄氏度...
20世纪60年代中期问世的等电聚焦电泳,是一种()。 A. 分离组份与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳技术 B. 能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的电泳技术 C. 利用凝胶物质作支持物进行的电泳技术 D. 利用有pH值梯度的介质,分离等电点不同的蛋白质的电泳技术 E. 用滤纸作为支持载体的电泳技术 ...
等电聚焦电泳技术等电聚焦(isoelectricfocusing,IEF)是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位,因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。?IEF的基本原理在IEF的电泳中,具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极,pH值逐渐增大。如前所述,...
按pH梯度的形成原理不同可分为载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳和固相pH梯度等电聚焦电泳。一、载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳:1、理想的载体两性电解质应具备的条件:载体两性电解质是两性分子,使其在电泳柱中能达到一个平衡位置。载体两性电解质可作为载体,但两性电解质不能用于等电聚焦。只有载体两......
等电聚焦(IEF)是利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术,特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分,在区带电泳中分辨率最好。 常用的pH梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等。 以上是小编为大家整理的内容,希望对大家有所帮助,更多关于临床检验技师的资讯请关注医学教育...
一、 实验介绍 毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。…