2-DE:二维凝胶电泳。由两向电泳组成,第一向是以蛋白质电荷差异为基础进行分离的等电聚焦凝胶电泳,第二向是以蛋白质相对分子质量差异为基础的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。基本原理:等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的净电荷或等电点进行分离的技术。在等电聚焦过程中,所采用的载体两性电解质可在电场中形成正极为酸性、...
二维凝胶电泳 (2-DE)二维凝胶电泳(2-DE) 被认为是蛋白质组学工作的有力工具。 它用于从生物样品中分离和分离复杂的蛋白质混合物。 2-DE 根据两个不同的步骤分离蛋白质：第一个称为等电聚焦(IEF)，根据等电点(pI) 分离蛋白质； 第二步是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），它根据分子量（相对分子量，...
二维凝胶电泳 (2-DE) 被认为是蛋白质组学工作的有力工具。 它用于从生物样品中分离和分离复杂的蛋白质混合物。 2-DE 根据两个不同的步骤分离蛋白质:第一个称为等电聚焦 (IEF),根据等电点 (pI) 分离蛋白质; 第二步是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),它根据分子量(相对分子量,Mr)分离蛋白质。 因此,...
2-DE 双向电泳 双向电泳（two-dimensional electrophoresis）是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合，即先进行等电聚焦电泳（按照pI分离），然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。蛋白质组研究 蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次...
二维凝胶电泳 (2-DE) 二维凝胶电泳 (2-DE) 被认为是蛋白质组学工作的有力工具。 它用于从生物样品中分离和分离复杂的蛋白质混合物。 2-DE 根据两个不同的步骤分离蛋白质:第一个称为等电聚焦 (IEF),根据等电点 (pI) 分离蛋白质; 第二步是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),它根据分子量(相对分子量,...
双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离，第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离，把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。分离蛋白质组所有蛋白的两个关键参数是其分辨率和可重复性。在目前情况下，双向凝胶电泳...
因此双向电泳可以把分子质量相同而pI不同或者pI相近而分子质量不同的蛋白质分离开来。(2)主要应用:蛋白质双向电泳作为蛋白质组学研究的重要技术,被广泛应用于诸多研究领域。①在动物科学研究方面,双向电泳被广泛应用于小鼠、兔、昆虫、牛、猪等相关蛋白质组学的研究方面。②在植物科学研究方面,双向电泳被广泛应用于...
(2)固相pH值梯度胶(IPG)胶的制备,利用不同pH固定化电解质的组合可配制不同pH范围的凝胶。 (3)双向电泳,先作第一向电泳,再进行第二向电泳。 (4)蛋白质的染色,主要根据上样量的多少及样品进一步分析要求等加以选择,常用的方法有考马斯亮蓝染色、银染、铜染等。
次等电聚焦中所出现的位置有所偏差,这样作为双向电泳中的一向时就限制了蛋白质分离的重复性。另外,SCA分子量相对较小,难以在IEF胶内固定,再等电聚焦过程中由于水合正离子引起电渗流(electroendosmosis)将致使SCA分子向负极迁移(负极漂移),结果使pH值的不稳定性增加。
Unlu等提出了一种荧光差异显示双向电泳(F-2D-DIGE)的定量蛋白质组学分析方法。差异凝胶电泳(DIGE)是对2-DE在技术上的改进,结合了多重荧光分析的方法,在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品,并第一次引入了内标的概念。 两种样品中的蛋白质采用不同的荧光标记后混合,进行2-DE,用来检测蛋白质在两种...