(1)原理:蛋白质双向电泳(2-DE)多指等电聚焦和SDS凝胶电泳相结合的分离技术。首先根据蛋白质等电点不同在pH梯度胶中等电聚焦将其分离,然后按照它们的相对分子质量大小在垂直方向或水平方向进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第二次分离,得到的电泳图谱上水平向分离反映pI的差别,垂直向分离反映分子量的不同。因此双向电泳可以...
Unlu等提出了一种荧光差异显示双向电泳(F-2D-DIGE)的定量蛋白质组学分析方法。差异凝胶电泳(DIGE)是对2-DE在技术上的改进,结合了多重荧光分析的方法,在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品,并第一次引入了内标的概念。 两种样品中的蛋白质采用不同的荧光标记后混合,进行2-DE,用来检测蛋白质在两种...
双向凝胶电泳（2-DE）双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离，第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离，把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。分离蛋白质组所有蛋白的两个关键参数是其分辨率和可重复性。在...
图-1. 等电聚焦的“聚焦效应” 次等电聚焦中所出现的位置有所偏差,这样作为双向电泳中的一向时就限制了蛋白质分离的重复性。另外,SCA分子量相对较小,难以在IEF胶内固定,再等电聚焦过程中由于水合正离子引起电渗流(electroendosmosis)将致使SCA分子向负极迁移(负极漂移),结果使pH值的不稳定性增加。 基于以上的种...
2-DE的基本操作步骤是什么?相关知识点: 试题来源: 解析 (1)样品制备,包括蛋白质的溶解、变性、还原以及去除蛋白质杂质等; (2)IPG胶的制备,利用不同pK固定化电解质的组合可配制不同pH范围的凝胶; (3)双向电泳,先进行第一向电泳:等电聚焦凝胶电泳,再进行第二向电泳:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳; (4)蛋白质的...
百度试题 题目13.简述蛋白质双向电泳(2-DE)的原理与主要应用 相关知识点: 试题来源: 解析反馈 收藏
2-DE 双向电泳 双向电泳（two-dimensional electrophoresis）是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合，即先进行等电聚焦电泳（按照pI分离），然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。蛋白质组研究 蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次...
2-DE的原理与实验步骤 双向[凝胶]电泳(英语:Two-dimensional[gel]electrophoresis)是蛋白质组学技术中最流 行最通用的蛋白质分离方法,依据等电点pI分离,然后再进行SDS-PAGE(按照分子大 小),是一种分辨率更高的蛋白质电泳检测技术。双向电泳后的凝胶经染色呈现二维分 布图,水平方向反映出蛋白在等电点上的差异,而...
百度试题 题目1.双向电泳技术(2-DE 相关知识点: 试题来源: 解析反馈 收藏
双向凝胶电泳