利用亚细胞定位技术,可以进一步研究转基因烟草植株中外源基因的定位。常用的方法包括荧光蛋白标记技术和抗体标记技术。荧光蛋白标记技术可以通过将外源基因与荧光蛋白基因进行融合,使转基因植株产生荧光蛋白标记,从而观察外源基因在细胞内的定位。抗体标记技术则是将外源基因编码的蛋白质与特异性抗体结合,通过免疫荧光染色等方法...
亚细胞定位之烟草转化方法本氏烟草(N. benthamian)瞬时表达及相关实验方法: 一、农杆菌介导的烟草瞬时转化: A、实验步骤: 1、根据实验需要,将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体中,并转化农杆菌。 2、将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中,28℃,200rpm过夜。 *估算时间,防止农杆菌液...
6.结果判定:试剂盒检测结果:取注射部位在激光共聚焦或者荧光显微镜下观察,含核定位菌液a3注射的烟草叶片区域细胞核呈现红色球状圆点(红色荧光蛋白),若目的基因的荧光蛋白亮点与红色球状亮点重合,说明该基因定位在细胞核,若目的基因的荧光蛋白亮点不与红色球状圆点重合,则说明该基因未在细胞核中表达。 注意事项:降低植物...
1、亚细胞定位之烟草转化方法Company number0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202W8本氏烟草(N. benthamian)瞬时表达及相关实验方法: 一、农杆菌介导的烟草瞬时转化:A、实验步骤:1、根据实验需要,将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体中, 并转化农杆菌。2、将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中...
亚细胞定位之烟草转化方法本氏烟草N. benthamian瞬时表达及相关实验方法: 一、农杆菌介导的烟草瞬时转化: A、实验步骤: 1、根据实验需要,将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体中,并转化农杆菌; 2、将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中,28℃,200rpm过夜; 估算时间,防止农杆菌液浓度超过1...
亚细胞定位之烟草转化方法亚细胞定位之烟草转化 本氏烟草 A、实验步骤: 1、根据实验需要,将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体中, 并转化农杆菌。 2、将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中,287,200rpm过夜。 *估算时间,防止农杆菌液浓度超过10D,否那么会影响转化效率, 3、当菌液OD值介于...
1、本氏烟草( N. benthamian )瞬时表达及相关实验方法:一、 农杆菌介导的烟草瞬时转化:A、实验步骤:1、 根据实验需要,将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体 中,并转化农杆菌。2、 将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中,28C, 200rpm过夜。*估算时间,防止农杆菌液浓度超过10D,否则会影...
亚细胞定位之烟草转化方法 本氏烟草(N. benthamian)瞬时表达及相关实验方法: 一、农杆菌介导的烟草瞬时转化: A、实验步骤: 1、根据实验需要,将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体中,并转化农杆菌。 2、将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中,28℃,200rpm过夜。 *估算时间,防止农杆菌液...
亚细胞定位之烟草转化方法 本氏烟草(N. benthamian)瞬时表达及相关实验方法: 一、农杆菌介导的烟草瞬时转化: A、实验步骤: 1、根据实验需要,将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体中,并转化农杆菌。 2、将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中,28℃,200rpm过夜。 *估算时间,防止农杆菌液...
亚细胞定位之烟草转化方法本氏烟草(N. benthamian)瞬时表达及相关实验方法: 一、农杆菌介导的烟草瞬时转化: A、实验步骤: 1、根据实验需要,将所要表达的基因克隆到含有不同标签的双元载体中,并转化农杆菌。 2、将新活化的农杆菌单克隆接种到含有相应抗生素的YEP中,28℃,200rpm过夜。 *估算时间,防止农杆菌液...