蛋白含量的测定常用的方法有:考马斯亮兰G-250染色法、双缩脲法、福林一酚试剂法、紫外吸收法。 (1)考马斯亮兰G-250染色法:考马斯亮兰G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色,在595nm处有最大的光吸收,其颜色深浅与蛋白质浓度成正比。因此可比色测定,测定范围为0.01～1.0mg/ml。 (2)...
根据蛋白质平均含氮量为16%的特点,通过测定氮的含量计算蛋白质含量。 (2)紫外吸收法。用紫外分光光度计在紫外光区测定蛋白质的光吸收,从而测定蛋白质含量的方法。 (3)双缩脲法。在碱性溶液中,蛋白质与铜离子形成紫色化合物,可在540nm处比色测定。其光吸收与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质的分子量大小及氨基酸...
总蛋白法是一种直接测定样品中总蛋白含量的方法,其原理是将待测样品与总蛋白试剂混合后在室温下反应,然后使用分光光度计测定产生的显色物质的吸光值,通过标准曲线计算出样品中蛋白质的含量。 总结,蛋白质含量的测定方法及原理有多种,每种方法都有其适用的样品类型和测定条件,研究人员可以根据自己的实验需要选择合适...
主要原理如下: (1)巴氏试剂法:这种方法是通过确定蛋白质含量测定蛋白质含量的最常用的方式,它是根据蛋白质和优化试剂之间的识别反应而设计的。传统的试剂处理方法包括用50%机载硝酸重铬酸钠或尿素钙反应试剂。 (2)生物素连锁酶循环放大:这种方法是一种全比色的方法,其基本原理是通过单链DNA的末端标记生物素识别酶...
@谱尼测试测定蛋白质含量的方法及原理 谱尼测试 测定蛋白质含量的方法有好几种呢,常见的比如凯氏定氮法、紫外吸收法、双缩脲法、福林-酚试剂法和考马斯亮蓝法。 凯氏定氮法是通过测定氮的含量来计算蛋白质含量,因为蛋白质平均含氮量约为16%。 紫外吸收法是用紫外分光光度计在紫外光区测定蛋白质的光吸收。
简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。 相关知识点: 试题来源: 解析 答:(1)考马斯亮蓝G-250染色法: 考马斯亮蓝G-250结合蛋白质后,形成蓝色CBG-蛋白质结合物,最大光吸收在595nm。在一定的蛋白质浓度范围内(10-1000ug/ml),CBG-蛋白质结合物的值与蛋白质含量成正比,故可用分光光度法进行蛋白质的定量测...
解析 (1)凯氏定氮法根据一毫克的氮相当于6.25毫克的蛋白质; (2)紫外吸收蛋白质的Tyr,Trp,phl残基在紫外区有光的吸收; (3)考马斯亮G-250染色法; (4)双缩脲法肽键与之反应生成紫色物质; (5)folin-酚试剂法苯酚基与之反应生成蓝色反馈 收藏
生物物理法是通过光学原理,利用蛋白质溶液对光的吸收、散射或旋光等性质进行测定,来间接推算蛋白质的含量。常用的生物物理法有紫外吸收光谱法、比色法和荧光法等。 (1)紫外吸收光谱法: 紫外吸收光谱法是通过蛋白质在紫外光区域的吸收特性来测定蛋白质的含量。蛋白质中主要是由氨基酸组成,而氨基酸中的芳香族氨基酸(如...
BCA法是一种常用的高灵敏度蛋白质测定方法,其原理是在碱性条件下,蛋白质与BCA试剂中的铜离子络合生成紫色的离子螯合物,通过比色法测定在562nm处的光吸收度,再根据标准曲线计算出蛋白质的含量。 二、光谱法 光谱法是一种基于蛋白质在特定波长下的吸收特性来测定蛋白质含量的方法。 1.紫外吸收法 紫外吸收法根据蛋...