密度梯度离心和流式分选是两种常用的细胞分离纯化技术,两种技术不论是在科学研究还是临床应用中都发挥着重要作用。密度梯度离心基于细胞密度差异进行细胞(核)分选,将细胞(核)混合物通过不同离心转速在离心管中因为密度不同而分层,形成密度梯度,根据细胞(核)密度差异收集不同分层中的目标样本,这种纯化分离方法存在一定...
流式分选,这项神奇的技术,可以像精确的细胞猎人一样,将细胞分门别类,让科学家们能够深入研究不同类型的细胞,解开生物学的奥秘。每个细胞都蕴藏着无限的可能性,通过流式分选,我们可以逐一揭开它们的神秘面纱。 William G. Telford在Frontiers in Mecidine杂志上发...
流式分选可以依据荧光信号的强度挑出特定生物学属性的细胞,相比起其他单细胞分离技术(如有限稀释法、激光捕获显微切割、显微操作等),其特定类型的单细胞获取更具准确性。另外,依赖于精确的液滴分析模式(如BD FACSAria 系列流式分选仪采用32 等份液滴分选模式,实现液滴的精确分析),流式可以准确判断相应液滴中目标细胞...
1. 打开流式细胞仪、开启液流、质控。2. 分选前设置:共包含两个步骤,第一,调节合适的液流断点,待四路窗口形成清晰的5路液流,其中含4个收集液流,一个废液流后,利用“sweetspot”锁住此断点;然后利用Accudrop 珠子,调整 “Drop Delay”时间,当左侧液流接近 100%,而且保持相对稳定的范围的时间是最佳...
细胞转染后,想用流式检测表达GFP细胞的百分比并且分选,但是不同的设门方法让GFP阳性细胞百分比看起来有差异,究竟下面哪种策略才适合呢? 今天我们主要讨论一下FSC和SSC上设门对GFP阳性细胞百分比的影响。让我们一个一个设门,把每种情况具体看一下。 保持FITC通道上的门不变,我们来看一下在前向和侧向的散点图上...
量化成像全光谱流式分选仪BD FACSDiscover S8设备功能上有什么独特性和先进性? 传统的流式细胞仪可以实现高通量的获取细胞表型和蛋白定量信息,但无法对蛋白表达模式及细胞功能进行直接分析;荧光显微镜可以实现直接获取细胞形态学信息,但无法进行...
流式分选纯化特异性细胞是目前实验中最常用的单细胞分选技术,一般需要优化荧光搭配、标记过程、仪器的设置等多个方面的细节才能得到最好的分选效果。然而,即便在最佳条件下,有些特定的细胞依然对于这种基于液滴流动的分选系统非常敏感,这种传统的流式仪器细胞分选最终依然可能导致细胞功能改变,甚至细胞死亡。这种因分选引起...
基于免疫识别特性的方法则包括荧光激活细胞分选方法(Fluorescence-activated cell sorting,FACS)和磁性激活细胞分选法(Magnetic-activated cell separation,MACS)。流式分选和磁性分选的基本原理 FACS得益于流式细胞术的兴起而诞生,其基本原理是,当含有单个细胞的液滴通过激光束时,其携带的各种荧光素、荧光染料及其...
单细胞(核)样本制备是单细胞测序中关键步骤之一,为了获得纯度好、质量高的单细胞(核)悬液,需要根据不同的样本类型和实验目的选择合适的方法进行细胞(核)纯化分离。密度梯度离心和流式分选是两种常用的细胞分离纯化技术,两种技术不论是在科学研究还是临床应用中都发挥着重要作用。密度梯度离心基于细胞密度差异进行细胞(核...