那么活死细胞染色试剂盒的原理是什么呢?常用的试剂盒一般都是Calcein-AM(无荧光)和PI的组合,其中Calcein-AM中的AM基团主要增加疏水性,以便其穿过活细胞细胞膜,当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein留在细胞内,发出强绿色荧光。只有活细胞可以将Calcein-AM水...
常见的活死细胞染色染料有以下几种: 1.羟乙基吡啶碘化物(HO/PI): HO/PI染料组合常用于活死细胞的鉴定,荧光分别在488/530 nm的波长下激发和发射。 2.二苯基氯化孤啉(DIOC6): DIOC6是一种用于活细胞染色的绿色荧光染料,适用于488 nm激发波长。 3.乙锭染料(EtBr):EtBr是一种常用的核酸染料,可用于活细胞和...
对于悬浮细胞，直接离心(4℃, 300g, 5 min）收集细胞。3. 用 PBS 洗涤细胞两次，移除液体。4. 在 24 孔板中，每个孔加入 0.5ml 染色工作液来，37℃避光孵育 15-30 min。5. 用 PBS 洗涤细胞两次。6. 将盖玻片覆盖到载玻片上，尽快使用适当的滤光片通过荧光显微镜分析细胞。为了获得更佳效果，可以使用抗...
因此,Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶(PI)等联合使用,同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶(Propidium iodide, PI)不能穿过活细胞的细胞膜,仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(Ex=535nm, Em=617nm),因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DN...
4℃。活死细胞染色试剂盒是一种疏水化合物，容易渗透完整的活细胞，进入细胞后被酯酶水解产生强烈荧光，用PBS洗涤细胞两次，4℃避光孵育15-30分钟即可染色。
作为核染色染料的 PI 不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光（激发：535nm，发射：617 nm），因此 PI 仅对死细胞染色。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用 545 nm 激发，仅可观察...
关于活死细胞染色的研究,Calcein AM和碘化丙啶(PI)这两种活死细胞染色试剂盒:Calcein AM是一种疏水化合物,容易渗透完整的活细胞,进入细胞后被酯酶水解产生强烈荧光,同时它能完整的保存在细胞细胞质中,酯酶活性与活细胞的数量成正比。对于具有完整膜的活细胞,DNA染料PI是J性的无法渗透细胞膜,它仅能结合死细胞的DNA...
对于活死细胞染色,常用的荧光染料包括乙酰乙酰氧基酮(Acridine Orange)和乙酰乙酰氧基酮(Propidium Iodide)等。 计算公式一般包括对活细胞和死细胞的荧光强度进行定量测量,并通过比较两者的荧光强度来评估细胞的存活状态。常见的计算公式包括: 1. 活细胞荧光强度 / 死细胞荧光强度。 2. (活细胞荧光强度 背景荧光)/(...
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