首先,建立了高效的体外泛素链合成体系,通过基因工程改造的泛素突变体(如K48R、K63R)和化学保护/去保护策略,能够精确制备特定长度(Ub2-Ub8)和拓扑结构(线性、K48/K63分支)的均一泛素链;其次,开发了基于GFP的报告系统,将合成的泛素链共价连接到经过工程改造的GFP...
泛素 泛素链泛素(Ubiquitin)是一种由 76 个氨基酸组成的高度保守的小分子蛋白质,广泛存在于真核细胞中。它在细胞内具有多种重要的功能,其中最主要的是作为一种标签,参与蛋白质的降解和修饰。 泛素通过与其他蛋白质结合形成泛素链(Ubiquitin Chain),从而标记需要被降解的蛋白质。这个过程被称为泛素化(Ubiquitination)...
K48泛素链抗体的原理是通过识别和结合K48链泛素化蛋白,从而促使其降解。这种抗体具有高度的特异性和亲和力,能够精确地识别泛素化蛋白中的K48链。当K48泛素链抗体与目标蛋白结合后,会通过一系列的信号传导和泛素酶的作用,将目标蛋白标记为待降解的物质。随后,泛素化蛋白将与蛋白酶体结合,被降解为小分子片段。 值得...
在泛素化蛋白质的结构上,由于底物蛋白上存在多个赖氨酸残基,这些赖氨酸位点中的一个或多个可同时被泛素修饰,形成了蛋白质翻译后修饰的宏观不均一性。即使在同一修饰位点也可形成不同赖氨酸参与的同质泛素链或者混合泛素链的修饰形式;而进一步深入研究还发现泛素分子的N端 (甲硫氨酸的游离氨基) 也可发生泛素化修饰...
泛素分子能够在不同赖氨酸残基上多聚化,进而形成异型泛素链。泛素链的分支结构对于蛋白质降解的精确调节至关重要。然而,异型泛素链的化学功能化仍是一个不小的挑战,这阻碍了对异型泛素链功能的系统评估。本文,作者报道了一种酰肼连...
该研究解析了一系列蛋白酶体在K48-Ub4泛素链存在下的近原子分辨率冷冻电镜结构,首次捕捉到蛋白酶体与K48-Ub4泛素链结合的三维结构,揭示了泛素链在调节蛋白酶体识别泛素化底物进而引发底物降解的分子机制,为最终阐明生理条件下蛋白酶体降解泛素化底物机制提供了关键结构基础。 泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome ...
多聚泛素化链是泛素分子通过共价键连接而形成的链状结构，其中每个泛素分子通过赖氨酸残基与下一个泛素分子连接。目前已知的多聚泛素化链类型主要包括以下几种：1. K63多聚泛素化链：由63个泛素分子组成，每个泛素分子通过赖氨酸残基与下一个泛素分子连接，形成一条线性链。2. K48多聚泛素化链：由48个泛素分子...
一、泛素活化 泛素活化是泛素链形成的第一步。在这个过程中,泛素被激活并转化为活化的泛素形式,即泛素腺苷酸。这个过程由泛素活化酶(E1)催化。首先,E1通过其酶活性位点上的腺苷酸转移酶活性,将ATP的腺苷酸部分转移到泛素的羧基端,从而生成泛素腺苷酸。这个反应需要消耗能量,即1个ATP分子被水解,生成1个AMP和1个磷...
因此,底物蛋白上不同泛素链种类和比例的改变可能介导了不同信号之间的转换,形成了严密调控的“泛素密码”【1】。 在众多的泛素链种类中,K48泛素链是功能研究最清楚的一种经典泛素链,主要介导了底物蛋白的蛋白酶体降解过程。然而,随着研究的拓展与深入,K48泛素链还具有非蛋白降解的功能。典型的例子是K48链作为转录...