新型冠状病毒的检测方法很多,实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)是目前核酸检测的主要方法,操作流程:采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。
(2)RT-PCR是先将新型冠状病毒的RNA逆转录成cDNA,然后再进行PCR(体外DNA复制),探针能与N基因序列特异性结合,由于DNA的结构为反向平行的两条链,5′与3′互补配对,因此与探针结合的序列应该是5′-AATCT……AGCAA-3′;PCR扩增时荧光探针被Taq酶切降解,使报告荧光基因和淬灭荧光基因基团分离,即每扩增一个DNA分子...
新型冠状病毒的核酸检测采用“实时荧光定量RT-PCR”技术,通常在1~2 h内即可得到检测结果。此方法是PCR技术和荧光检测技术的结合,利用荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行检测分析。步骤如下图所示。 (1)利用样本中提取的RNA获得cDNA,过程①使用 酶。需要将样本中的RNA经过过程①形成cDNA后再进行PCR扩增的...
新冠病毒的检测方法主要包括核酸检测和抗体检测等,核酸检测法--般是采用实时荧光RT-PCR法检测的,首先将提取的病毒基因组RNA通过反转录变成互补DNA(cDNA),然后再用病原体特异性的引物,以cDNA作为模板扩增病原体核酸系列,因为在扩增的过程中,荧光染料能同步整合在产物上,所以研究者可以通过荧光信号的强弱进行实时检测。
如图为采用“实时荧光定量RT-PCR”技术检测新型冠状病毒核酸的基本流程,1～2h内即可得到检测结果。其基本原理是在DNA的复制过程中加入与特定模板链互补的荧光探针,这样
实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针 和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发岀的淬灭基团,新链 延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发岀荧光。利用 RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( ) A. RT-PCR技术需要...
PCR技术与DNA体内复制的复制方式都是半保留复制;RT-PCR过程中cDNA的合成为逆转录过程,需向装置中添加逆转录酶。 (2) 根据图示,RNA提取裂解液含有的蛋白酶K,可以促进病毒蛋白质的水解,起到灭活病毒的作用;采样后迅速进行病毒灭活,可以防止样本在运输和检测阶段造成病毒泄漏,以提高样本转运和检测阶段的安全性;RNA酶能...
10.实时荧光 RT -PCR可用于 RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。 利用 RT一PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。 下列说法错误的是C C)B引物※引物...
实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如下图所示。下列有关叙述错误的是( ) A. 该技术的原理...