实时荧光RT-PCR可用于新型冠状病毒的核酸检测,RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式扩增反应相结合的技术,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测...
实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( ) A. 做RT-PCR之前,需要先...
实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针 和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发岀的淬灭基团,新链 延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发岀荧光。利用 RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( ) A. RT-PCR技术需要...
新型冠状病毒的检测方法很多,实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)是目前核酸检测的主要方法,操作流程:采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。
“实时荧光定量RT-PCR”是新冠疫情防控的一把利刃,通常在l～2h内即可得到检测结果。TaqMan探针是实时荧光定量RT-PCR技术中一种常用探针(如图1),其5末端连接荧光基团(R),3末端连接淬灭剂(Q)。当探针完整时,R发出的荧光信号被Q吸收而不发荧光。在PCR扩增过程中,当Taq酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和...
新型冠状病毒的检测方法很多,实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)法是目前核酸检测的主要方法,操作流程:采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。如图是RT-PCR两步法的过程图,在PCR扩增时加入能与目的基因(新冠病毒的核壳蛋白N基因)结合的荧光探针。目的基因合成越多,荧光信号越强,回答下列问题。(1...
荧光RT-PCK检测病毒核酸阳性是新型冠状病毒(+RNA病毒)感染确诊的标准。实时荧光RT-PCR核酸检测的基本原理:用特定的 TaqMan探针(单链小DNA片段,检测不到荧光)与待测基因序列结合,随着PCR 扩增反应的进行,TaqMan探针被具有外切酶活性的Taq酶切除水解并发出荧光,荧光强度反映扩增后待测基因的总量。原理如下图探针水解TaqMa...
新冠病毒核酸检测时常用实时荧光RT一PCR技术。TaqMan探针为一小段可与目标序列互补的脱氧核苷酸单链,且5′端含一个荧光基团R,3′端含一个淬灭基团QPCR复性的过程中,TaqMan探针和目标序列结合,新链延伸时,在DNA聚合酶的作用下,荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。下列叙述错误的是( ) A. RNA不能作为PCR的模板,需...
下图为采用“实时荧光定量RT-PCR”技术检测新型冠状病毒核酸的基本流程,1~2h内即可得到检测结果。其基本原理是在DNA的复制过程中加入与特定模板链互补的荧光探针,这样每新合成一条DNA单链,就会产生一个荧光分子,通过检测荧光信号即可确定是否为阳性。下列相关说法正确的是( )A.①、②过程需要分别加入四种核糖核苷酸和...